間接熒光抗體試驗(yàn)(IFAT)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、直接凝集試驗(yàn)(DAT)、間接血球凝集試驗(yàn)(IHA)、對(duì)流免疫電泳(CIE)、重組抗原(rK39)試紙條、酶聯(lián)免疫印漬技術(shù)等。

國(guó)內(nèi)外一致認(rèn)為IFAT是診斷黑熱病較敏感的一種方法，李國(guó)茹等用IFAT共檢查l9例病人，其中l(wèi)0例骨位穿刺確診的現(xiàn)癥病人均為陽(yáng)性(1：160～1：10 240)，5例疑似病人亦陽(yáng)性(1：4～1：5 120)，經(jīng)銻劑治療后痊愈，說(shuō)明IFAT 可較早發(fā)現(xiàn)病人，能及時(shí)和準(zhǔn)確地反映疫區(qū)人群中黑熱病的流行現(xiàn)狀。

而ELISA則是一種比較快速的檢測(cè)方法，王秀珍等建立的快速ELISA法，對(duì)37例臨床癥狀疑似黑熱病者，同時(shí)作骨滋穿刺和耳垂采血作快速ELISA，二者陽(yáng)性符合率100%，其中3例骨穿陰性，快速ELISA陽(yáng)性的病人，經(jīng)再次作骨穿和復(fù)查原骨翻片均查見(jiàn)利杜體。這不僅為有臨床癥狀而骨穿陰性者提供較可靠的輔助診斷．而且可用于現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行傳染源監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查。

為了檢測(cè)更加方便，一些學(xué)者研發(fā)了試紙條。2005年李國(guó)茹等通過(guò)rK39試紙條與病原學(xué)兩種診斷黑熱病方法的比較，判斷rK39試紙條檢測(cè)黑熱病的可靠性，結(jié)果顯示應(yīng)用rK39試紙條診斷黑熱病現(xiàn)癥患者的陽(yáng)性檢出率可達(dá)96.07% ，與病原學(xué)方法相比，檢出率明顯提高(P<0．01)。

利用IFAT和ELISA方法檢測(cè)具有較高的臨床價(jià)值，但這兩種方法常和某些疾病存在交叉反應(yīng)，故使用上有一定的局限性。鮑勇等利用免疫印漬技術(shù)分析杜氏利什曼前鞭毛體蛋白分子量，并用其蛋白帶分別和黑熱病人血清及其他血清進(jìn)行酶聯(lián)免疫印漬試驗(yàn)，結(jié)果顯示63ku的特異性和靈敏度都非常高，僅和麻風(fēng)病人有輕度交叉反應(yīng)，這證明63ku是杜氏利什曼前鞭毛體特異性抗原，該診斷方法較簡(jiǎn)單，結(jié)果較可靠，和麻風(fēng)病人的輕度交叉反應(yīng)易從臨床上予以區(qū)別。有學(xué)者認(rèn)為39ku也是杜氏利什曼前鞭毛體特異性抗原，胡孝素等對(duì)健康人、非黑熱病病人和11例確診黑熱病病人的血清進(jìn)行不同程度的稀釋，并將表達(dá)杜氏利什曼原蟲(chóng)39ku抗原的大腸埃希菌稀釋到達(dá)1：400時(shí)，全部黑熱病患者的血清均能識(shí)別重組杜氏利什曼原蟲(chóng)39ku抗原，具有臨床診斷價(jià)值 。

國(guó)外黑熱病的診斷方法
尿樣直接凝集試驗(yàn)、免沉淀試驗(yàn)、蒸餾水試驗(yàn)，醛凝試驗(yàn)和尿斯銻巴明試驗(yàn)、制動(dòng)試驗(yàn)等。以往診斷黑熱病的方法是血清直接凝集試驗(yàn)和尿樣酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn).

在英國(guó)Islain M Z等研究中介紹它們的敏感度分別為91.0% ，93.3%，EI ISA特異度為97.3%。Islam MZ與日本Aichi醫(yī)科大學(xué)寄生蟲(chóng)學(xué)教研室及其他幾個(gè)大學(xué)共同研制出一種新型的以尿樣為標(biāo)本的直接凝集試驗(yàn)，結(jié)果顯示，ELISA及尿樣凝集試驗(yàn)的特異度無(wú)顯著性差異，由于該法與以往的血清直接凝集試驗(yàn)和尿樣酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)相比，在檢測(cè)條件上具有簡(jiǎn)便易行、無(wú)創(chuàng)傷等諸多優(yōu)越性，而且省去了ELISA所需的儀器設(shè)備，因此，對(duì)于診斷黑熱病尤其是野外診斷具有非常重要的意義。

還有一種常被用于檢測(cè)黑熱病的方法是免疫沉淀法。法國(guó)學(xué)者在常有黑熱病的地中海沿岸地區(qū)廣泛應(yīng)用其對(duì)人和犬的進(jìn)行調(diào)查，根據(jù)其研究，在確診為黑熱病的病例中，呈現(xiàn)沉淀反應(yīng)的陽(yáng)性率為64%～95%。醛凝試驗(yàn)也是一種簡(jiǎn)單快速的診斷黑熱病的方法，其方法是在病人的1mL血清內(nèi)加1滴乙醛福爾馬林，在幾分鐘內(nèi)出現(xiàn)的白膠狀物就算是陽(yáng)性反應(yīng)。在疾病治愈后陽(yáng)性反應(yīng)就消失，而消失的原因與球蛋白滴定度的降低有密切的關(guān)系。這種試驗(yàn)為非特異性或弱特異性，因?yàn)橛善渌�原因所引起的高丙種球蛋白貧血病也常出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，因此不建議使用該方法診斷黑熱病。

國(guó)外還曾有人研究應(yīng)用制動(dòng)試驗(yàn)檢測(cè)黑熱病，有學(xué)者曾報(bào)告在皮膚利什曼病人的血清中含有制動(dòng)抗體。但是，這個(gè)報(bào)告值得懷疑，因?yàn)樵谒麄兊脑囼?yàn)中曾加入一種補(bǔ)體，而這種補(bǔ)體的一個(gè)組成部分很可能就是正常血清中的一種使利什曼原蟲(chóng)前鞭毛體不動(dòng)的熱不穩(wěn)定因素。所以這種試驗(yàn)在目前還沒(méi)有被廣泛應(yīng)用。

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