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利什曼原蟲檢測試劑
科潤達(dá)生物有提供美國Cortez品牌和德國DRG品牌的利什曼原蟲檢測試劑,兩個(gè)品牌的試劑都是采用ELISA方法進(jìn)行檢測,該方法操作簡單方便,無需特殊儀器、產(chǎn)品靈敏度高,特異性強(qiáng),檢測結(jié)果準(zhǔn)確。利什曼原蟲檢測試劑應(yīng)用于科研使用。下面是關(guān)于利什曼原蟲檢測試劑的產(chǎn)品信息介紹。更多產(chǎn)品信息可咨詢我們獲取。
中文名稱:利什曼原蟲檢測試劑
英文名稱:Leishmania detection reagent
產(chǎn)品貨號:8203-35
產(chǎn)品規(guī)格:96T
檢測方法:ELISA
產(chǎn)品品牌:美國Cortez
供應(yīng)商家:深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司
預(yù)期用途
利什曼原蟲檢測試劑可用于定性篩選血清中的內(nèi)臟利什曼原蟲IgG抗體 。僅用于科研使用。
利什曼原蟲病介紹
利什曼原蟲是一種影響了世界上數(shù)百萬人口的普遍疾病。從范圍來看,利什曼蟲已經(jīng)成為一種遍布各大洲嚴(yán)重的感染病,尤其是歐洲,印度,亞洲,非洲和中東地區(qū)。
內(nèi)臟利什曼病,又稱為黑熱病,是通過被感染的白蛉叮咬傳播給人類的,這種白蛉寄生于杜氏利什曼蟲復(fù)合體。當(dāng)白蛉與接觸感染對象(比如狗)接觸后就成為利什曼蟲的宿主了。
由于內(nèi)臟利什曼蟲攻擊肝脾等內(nèi)臟系統(tǒng)以及免疫系統(tǒng),通常利什曼蟲已與AIDS感染密切相關(guān)。內(nèi)臟利什曼原蟲是一種高死亡率的嚴(yán)重疾病。
實(shí)驗(yàn)方法對比
下面幾種測試方法已用于診斷急性內(nèi)臟利什曼病。例如,間接熒光免疫抗體測試(IFAT)和直接凝集實(shí)驗(yàn)(DAT)是實(shí)踐中的兩個(gè)血清學(xué)診斷方法,這是因?yàn)榭估猜x抗體的滴度在急性階段通常很高。另一個(gè)不太成功的方法是骨髓穿刺。這種方法不僅痛苦和危險(xiǎn),而且成功率也不高。另外,ELISA方法是目前受歡迎的血清學(xué)診斷方法,有時(shí)會與IFAT和DAT結(jié)合使用。
實(shí)驗(yàn)原理
利什曼蟲的ELISA試驗(yàn)原理是一個(gè)三步溫育過程:
初次溫育涉及利什曼蟲抗原在ELISA板孔上的包被。在這一步中,任何與抗原反應(yīng)的抗體都會結(jié)合到板孔中。然后,洗凈板孔除去測試樣品。隨后加入酶標(biāo)記物。
在第二次溫育時(shí),酶標(biāo)記物將與任何存在的抗體結(jié)合。
在第三次溫育前,需要充分洗滌板孔。然后加入顯色劑四甲基聯(lián)本胺(TMB)。酶標(biāo)記物催化過氧化氫的氧化反應(yīng),顯色劑變?yōu)樗{(lán)色。加入終止液后藍(lán)色會變?yōu)槊髁恋狞S色。反應(yīng)即終止?捎妹笜(biāo)分析儀讀取實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣品收集和準(zhǔn)備
1. 凝血及分離的血清。如果不能立即使用,則需要將樣品凍存于-20ºC甚至更低的環(huán)境下。
2. 不要加熱滅活血清。
3. 避免反復(fù)凍融樣品。
利什曼原蟲檢測試劑成分
1. ELISA板:包被了利什曼蟲抗原的微量滴定板,96孔式。
2. 酶標(biāo)記物:1×11ml/瓶,含硫柳泵穩(wěn)定緩沖液的辣根過氧化物酶(HRP)。
3. 陽性質(zhì)控:1×1ml/瓶,含硫柳泵緩沖液的稀釋利什曼蟲陽性人血清。
4. 陰性質(zhì)控:1×1ml/瓶,含硫柳泵緩沖液的稀釋利什曼蟲陰性人血清。
5. TMB底物溶液:1×11ml/瓶,TMB顯色劑。
6. 濃縮洗滌液20X:1×25ml/瓶,濃縮緩沖液和表面活性劑。
7. 稀釋緩沖液:2×30ml/瓶,緩沖蛋白溶液。
8. 終止液:1×11ml/瓶,濃度為1mol/L的磷酸。
實(shí)驗(yàn)需要但未提供的設(shè)備
1. 移液管
2. 洗滌板條用的擠壓瓶
3. 去離子水
4. 帶有450nm和620-650nm波長濾光片的酶標(biāo)分析儀(可選目測讀取結(jié)果)
5. 血清稀釋用試管
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上2個(gè)質(zhì)控品決定所需的板條數(shù),并將其放置在托架上。
2. 加入100µl的陰性質(zhì)控至1號孔,100µl的陽性質(zhì)控至2號孔,以及將100µl稀釋過的樣品(1:40)溶液加入到剩下的孔中。(注意:陰性及陽性質(zhì)控品是預(yù)稀釋過的,請勿進(jìn)一步稀釋)
3. 在室溫(15-25℃)下溫育10分鐘。
4. 震蕩甩出洗滌液,并用稀釋過的洗滌緩沖液清洗三次。
5. 每孔加入2滴酶標(biāo)物。
6. 室溫下溫育10分鐘。
7. 震蕩甩出洗滌液,并用洗滌緩沖液清洗三次。
8. 每孔加入2滴顯色劑。
9. 在室溫下溫育5分鐘。
10. 加入2滴終止液,輕敲ELISA板使孔內(nèi)溶液混合。
11. 對空氣讀數(shù)調(diào)零后讀取450nm處的OD值(參考波長620-650nm)
洗滌包括用稀釋的洗滌緩沖液填充每一個(gè)板孔,震蕩甩出內(nèi)容物后重復(fù)此操作三次。洗滌過程中孔內(nèi)避免產(chǎn)生氣泡。每次使用試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),都需要使用質(zhì)控品。
性能特點(diǎn)
敏感度:30/31=97%
特異性:53/63=84%
想了解更多產(chǎn)品信息,歡迎咨詢我們獲取資料,科潤達(dá)還有其他品牌的利什曼原蟲快速檢測試劑,如有需要也可聯(lián)系我們。
更新時(shí)間:2024/10/11 16:13:03
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