乙腦病毒IgM酶聯(lián)診斷試劑盒

產(chǎn)品資料

通用名稱：乙腦病毒IgM檢測(cè)試劑盒（捕獲法）

英文名稱：JE Detect?IgM Antibody Capture ELISA (MAC-ELISA)

產(chǎn)品規(guī)格：96T

產(chǎn)品用途

乙腦病毒IgM酶聯(lián)診斷試劑盒可用于人血清中抗重組抗原（來(lái)源于JEV）的IgM抗體的檢測(cè)。此試劑盒并不用于血液或血液成分的篩查，且該試劑盒尚未針對(duì)疫苗誘導(dǎo)的血清轉(zhuǎn)化研究進(jìn)行優(yōu)化，僅供專業(yè)人士和體外檢測(cè)使用。

【前言簡(jiǎn)介】

感染日本腦炎病毒會(huì)引起包括腦炎等一系列癥狀。本試劑盒使用了一種稱為JERA的重組抗原，它可以作為日本腦炎病毒感染的血清學(xué)敏感標(biāo)記物。JERA蛋白是由日本腦炎病毒抗原的不同部分的肽鏈構(gòu)成的重組抗原。

測(cè)定原理

乙腦病毒IgM酶聯(lián)診斷試劑盒由一種酶促擴(kuò)增的“兩步”夾心式免疫測(cè)定法組成。在測(cè)試中，JE陰性質(zhì)控，陽(yáng)性質(zhì)控和使用樣本稀釋液稀釋的未知樣本首先加入到包被有抗人IgM抗體的微孔板上進(jìn)行孵育，洗板之后分別與JEV衍生的重組抗原（JERA）和正常細(xì)胞抗原（NCA）一起溫育。再次洗板后加入HRP標(biāo)記的抗乙腦抗體。洗板，加入TMB作為顯色劑，一段時(shí)間后加入終止液以終止底物反應(yīng)。所形成的顏色強(qiáng)度與樣本中的特異性抗體成正比。當(dāng)吸光度高于一定值時(shí)，JERA和質(zhì)控品的吸光率可準(zhǔn)確地測(cè)定JEV抗體是否存在。

檢測(cè)流程

1）確定所需微孔板數(shù)量并做好標(biāo)記（JERA和NCA部分質(zhì)控品都應(yīng)做雙孔，樣本可做單孔或雙孔）

2）用樣本稀釋緩沖液1:100稀釋血清樣本和質(zhì)控品（至少使用4?L進(jìn)行稀釋，例如，4?L血清+396?L樣本稀釋緩沖液）

3）將50?L稀釋后的質(zhì)控品和樣本加入相應(yīng)的孔中

4）封板，在37℃培養(yǎng)箱中孵育1小時(shí)

5）在洗板機(jī)上每孔每次用300?L洗滌緩沖液洗滌6次

6）將50?L JERA加入A-D行中，將50?L NCA加入E-H行中

7）封板，在37℃培養(yǎng)箱中孵育1小時(shí)

8）重復(fù)洗滌步驟

9）將50?L酶聯(lián)物加入每個(gè)孔中

10）封板，在37℃培養(yǎng)箱中孵育1小時(shí)

11）重復(fù)洗滌步驟

12）將150?L EnWash加入所有孔中

13）封板，在室溫下孵育5分鐘

14）重復(fù)洗滌步驟

15）將75?L底物液加入所有孔中

16）在室溫下黑暗中孵育10分鐘（不封板）

17）將50?L終止液加入所有孔中

18）加入終止液后5分鐘內(nèi)，測(cè)量450nm處吸光度

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更新時(shí)間：2024/10/11 16:13:16