【檢測(cè)原理】

此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔板上包被了抗原。用對(duì)人IgG具有特異性的酶標(biāo)二抗來(lái)檢測(cè)結(jié)合到包被抗原的樣品特異性抗體。底物反應(yīng)后，所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測(cè)到的IgG特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接使用標(biāo)準(zhǔn)曲線得。

檢測(cè)步驟

1) 加100µL標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控品和已稀釋樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中，在定性檢測(cè)中只使用標(biāo)準(zhǔn)品B。雙孔檢測(cè)可提高分析可靠性。

2) 封板后37℃溫育60分鐘。

3) 移去封板紙，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。

4) 在每一微孔中加入100µL酶聯(lián)物。

5) 封板后室溫37℃溫育60分鐘。

6) 移去封板紙，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時(shí)，如果有條件的話，可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時(shí)間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生。

7) 每孔加TMB底物液100µL。

8) 室溫（18℃-25℃）避光溫育30分鐘。

9) 在每一微孔中加入100µLTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)微孔板以使試劑混合均勻。此時(shí)，顏色藍(lán)色變成黃色。

10) 加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)OD值。