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標(biāo)簽:皮質(zhì)醇 血漿皮質(zhì)醇 尿液皮質(zhì)醇
血漿皮質(zhì)醇激素檢測(cè)ELISA試劑盒(測(cè)尿液)EIA-2989
ELISA方法終止及讀板過程常見問題及解答
終止液加樣時(shí)產(chǎn)生氣泡;
終止不均勻
酶標(biāo)板板底臟污
讀數(shù)波長(zhǎng)錯(cuò)誤,
終止液加入后,長(zhǎng)時(shí)間不讀板
解決辦法:
加終止液時(shí),應(yīng)避免起泡,以免造成假陽性
終止液加入后應(yīng)輕輕振板,使終止液與板孔內(nèi)溶液充分混勻;
酶標(biāo)板讀數(shù)前,應(yīng)輕輕拭去板底的水跡和污物,保證板底干潔,以免影響讀數(shù);
應(yīng)根據(jù)底物液選擇合適的讀數(shù)波長(zhǎng),如TMB一般選擇450nm波長(zhǎng),PNPP一般選擇405nm波長(zhǎng)等;
加入終止液后,應(yīng)盡快讀板,酶標(biāo)板內(nèi)顏色會(huì)隨著終止時(shí)間的延長(zhǎng)而變淡,因此,醉好是在終止后10分鐘內(nèi)讀板。
通用名稱:可的松檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Urinary Cortisol
公司品牌:德國DRG
產(chǎn)品貨號(hào):EIA-2989
產(chǎn)品規(guī)格:96T
檢測(cè)樣本:尿液
儲(chǔ)存條件:2—8℃
檢測(cè)方法:ELISA方法
預(yù)期用途:僅用于科研,體外檢測(cè)使用
參考價(jià)格:詢價(jià)
供應(yīng)商家:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
產(chǎn)品規(guī)格
96T
產(chǎn)品用途
血漿皮質(zhì)醇激素檢測(cè)ELISA試劑盒(測(cè)尿液)使用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法定量檢測(cè)尿液中游離可的松。
測(cè)定原理
血漿皮質(zhì)醇激素檢測(cè)ELISA試劑盒(測(cè)尿液)的檢測(cè)實(shí)施時(shí),樣本中的尿液可的松與辣根過氧化物酶標(biāo)記的可的松競(jìng)爭(zhēng)連結(jié)到包被板中的抗可的松抗體。溫育后,經(jīng)洗滌,連結(jié)的與游離的可的松分開。加入H2O2和TMB底物液,經(jīng)一段時(shí)間后,生成了顏色,加入終止液終止酶促反應(yīng)并檢測(cè)吸光度。計(jì)算尿液中可的松需要一系列的標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣本中尿液可的松濃度與顏色強(qiáng)度成正相關(guān)。
因需要進(jìn)行雙孔檢測(cè),每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度(S0-S4)需要兩個(gè)孔,空白對(duì)照為單孔。
試劑 | 標(biāo)準(zhǔn)品/質(zhì)控品 | 樣品 | 空白 |
標(biāo)準(zhǔn)品S0-S4 質(zhì)控品 | 10 µL | ||
稀釋的樣本 | 10µL | ||
稀釋的酶聯(lián)物 | 300µL | 300µL | |
37℃溫育1小時(shí)。 倒去孔中溶液,用350µL稀釋好的洗液洗滌3次 | |||
TMB底物液 | 100µL | 100µL | 100µL |
室溫(22-28℃)下溫育15分鐘,避光 | |||
終止液 | 100µL | 100µL | 100µL |
輕輕搖動(dòng)微孔板,在450nm讀出吸光度(以空白孔為參照) |
血漿皮質(zhì)醇激素檢測(cè)ELISA試劑盒(測(cè)尿液)包括以下:
標(biāo)準(zhǔn)品
S0 1×4ml
S1-S4 4×1ml
洗滌液 50ml
磷酸鹽緩沖液0.2M 10倍濃縮
酶聯(lián)物 33ml
HRP標(biāo)記的可的松
微孔板 12×8
包被了抗可的松抗體
底物液 15ml
H2O2-TMB 0.26g/L(避免接觸皮膚)
終止液 15ml
硫酸0.15mol/L(避免接觸皮膚)
質(zhì)控品(低) 1ml
即用型
質(zhì)控品(高) 1ml
即用型
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更新時(shí)間:2024/10/11 16:13:16
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