1、應(yīng)用范圍

此試劑盒可用于人血清中抗內(nèi)臟利什曼原蟲IgG的篩查檢測(cè)。

2、前言說(shuō)明

內(nèi)臟利什曼�。╒L）是一種死亡率很高的惡性疾病，主要由杜氏利什曼原蟲引起。白蛉是VL傳播的主要媒介，而狗是白蛉的主要攜帶者。VL是許多國(guó)家的一種地方性疾病，在大多發(fā)展中國(guó)家中，VL也是一個(gè)嚴(yán)重的問題，特別在那些人口集中的城市里。這種疾病在拉丁美洲、東非、中東、印度和中國(guó)都有很高的發(fā)病率。VL也會(huì)傳播到靠近地中海的一些國(guó)家去，如意大利、法國(guó)南部、西班牙、葡萄牙和非洲南部。在歐洲南部，VL已成為AIDS病人中主要的機(jī)會(huì)性傳染病。急性VL的診斷通常是通過(guò)抽吸骨髓來(lái)直接鑒別其寄生蟲。這種鑒定方法對(duì)人體有侵襲性，疼痛并且危險(xiǎn)，而且經(jīng)常因不能從組織中分離到寄生蟲而使得鑒定的成功率非常小。另外，在急性疾病階段，抗利什曼原蟲抗體的滴度非常高，血清篩查的方法已廣泛被應(yīng)用。ELISA應(yīng)當(dāng)是VL血清學(xué)診斷的實(shí)驗(yàn)方法，盡管免疫熒光抗體檢測(cè)和直接凝集實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的是整個(gè)寄生蟲，但它們?nèi)匀槐粡V泛應(yīng)用（ELISA一起用或單獨(dú)用）。

3、實(shí)驗(yàn)原理

在次溫育時(shí)，病人血清中的抗體結(jié)合到檢測(cè)孔的抗原上。在第二次溫育時(shí)，酶復(fù)合物可結(jié)合到抗原抗體復(fù)合物上。洗板除去未結(jié)合的酶聯(lián)物，加入顯色劑，有酶聯(lián)物和過(guò)氧化物酶的情況下會(huì)顯示藍(lán)色。之后加入終止液終止酶反應(yīng)，此時(shí)溶液由藍(lán)色變成黃色。

4、試劑盒成分

1） 包被了利什曼原蟲抗原的微孔板

2） 酶聯(lián)物

3） 陽(yáng)性質(zhì)控

4） 陽(yáng)性質(zhì)控

5） 顯色劑

6） 濃縮洗滌液

7） 稀釋緩沖液

8） 終止掖

5、儲(chǔ)存條件

試劑、板條和瓶裝成分

l 儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。

l 含洗滌液的洗滌瓶必須儲(chǔ)存在室溫下。

6、準(zhǔn)備

洗滌緩沖液：打開試劑瓶，在其中加入475ml去離子水，之后將稀釋好的洗滌緩沖液到入塑料擠瓶。

實(shí)驗(yàn)樣品：用稀釋緩沖液制備1：40的病人血清。

7、血清的采集與準(zhǔn)備： 略

8、實(shí)驗(yàn)步驟： 略

9、結(jié)果說(shuō)明

分光光度計(jì)：450nm和620-650nm處讀取OD值。

陽(yáng)性：OD值大于或等于0.2。

陰性：OD值小于0.2。

視覺：如果反應(yīng)液所顯示的顏色很明顯，則樣品應(yīng)當(dāng)被視為陽(yáng)性。

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