可的松Cortisol酶免試劑盒（尿液）使用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法定量檢測(cè)尿液中游離皮質(zhì)醇
 

實(shí)驗(yàn)原理

樣本中的尿液皮質(zhì)醇與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的皮質(zhì)醇競(jìng)爭(zhēng)連結(jié)到包被板中的抗皮質(zhì)醇抗體。

溫育后，經(jīng)洗滌，連結(jié)的與游離的皮質(zhì)醇分開。加入H2O2和TMB底物液，經(jīng)一段時(shí)間后，生成了顏色，加入終止液終止酶促反應(yīng)并檢測(cè)吸光度。計(jì)算尿液中皮質(zhì)醇需要一系列的標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣本中尿液皮質(zhì)醇濃度與顏色強(qiáng)度成正相關(guān)。

試劑、材料和儀器

提供的試劑和材料

1 皮質(zhì)醇標(biāo)準(zhǔn)品 STD0-STD4

2 孵化緩沖液

  磷酸鹽緩沖液

3 酶聯(lián)物  HRP標(biāo)記的皮質(zhì)醇

4 包被板，可分拆

5 TMB底物液

6 終止液

7 質(zhì)控品（低）

8 質(zhì)控品（高）

儀器

移液器

酶標(biāo)儀（450nm）

實(shí)驗(yàn)步驟： 略

結(jié)果

平均吸光度

計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品、樣本的平均吸光度值。

標(biāo)準(zhǔn)曲線

以標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值為Y軸，相應(yīng)的濃度為X軸，作出優(yōu)的擬合曲線（可選擇4參數(shù)邏輯函數(shù)）。

計(jì)算結(jié)果

將樣本的吸光度值插入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，則可讀出相應(yīng)的濃度，單位為ng/ml。

計(jì)算尿液中皮質(zhì)醇濃度（24h），按以上計(jì)算出濃度，然后再乘以24小時(shí)內(nèi)的尿液總體積

ng/ml x 24小時(shí)尿液體積（ml）/1000=µg Cortisol/24h

參考值

50—190µg/24h

本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)！

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