通用名稱：抗精子抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

英文名稱：Spermatozoa-Ab ELISA

【產品規(guī)格】

96T

【預期用途】

用于人血清中抗精子表面抗原自身抗體體外定性檢測

【前言簡介】

在西方國家，不孕夫婦的比例占總人群的10~15%（Haas et al，1980）。目前人們還不能精確的知道由免疫學因素導致不孕的發(fā)病率是多少。由于有很多不同的檢測方法，人們對抗精子抗體在不孕中的作用存在著很大爭議。在檢測抗精子抗體的傳統檢測方法中，精子凝集檢測和精子固定檢測已被廣泛應用。這些方法及其它凝集檢測都很耗費時間，并且結果與其操作不協調。與傳統的檢測方法相比，用ELISA檢測抗精子抗體具有很多優(yōu)點。IBL公司的抗精子抗體ELISA試劑盒結合這些優(yōu)點，并同時還具有高靈敏度和高特異性的特點。此試劑盒操作簡單，并且可以檢測很多種血清。

【檢測原理】

此檢測試劑盒利用的是非競爭性的原理。包被在微孔中的精子表面抗原是從池子中提取到的，它采用的方法是Alexander在1984年所提及到的那種方法。將疑似免疫學不孕病人的血清（已稀釋好）加入到包被孔中溫育，之后洗板，再加入過氧酶標記的抗人免疫球蛋白（IgA，IgG和IgM）并溫育。溫育后洗板，再加入TMB底物液，并酶標儀檢測所顯示的顏色強度。微孔中所顯示的顏色強度與結合的免疫球蛋白濃度成正比。實驗結果可從標準曲線上讀取，結果單位為units/ml。

【試劑盒組成成分】

微孔板        12×8孔

微孔中包被了精子表面抗原。

標準品        3支

凍干粉，將每支凍干粉溶解于1ml的洗滌液中。重新配制好的標準品（標準品S5）100μl內含500mU抗精子抗體。

酶聯物        100μl

601倍濃縮，內含HRP標記的抗人IgG、IgA、IgM，使用前用稀釋液按1：601的比例進行稀釋。

TMB底物液    12ml

即用，內含TMB及穩(wěn)定劑。

TMB終止液    12ml

即用，內含1M的H₂SO₄，注意：避免皮膚接觸。

洗滌液         50ml

20倍濃縮，用雙蒸水按1：20的比例稀釋，配置好的洗滌液在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放4周。

稀釋液         3×20ml

配置好的稀釋液在2~8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放2天，如果凍存于-20℃的環(huán)境下則可存放更長時間。

質控血清       3×1ml

質控血清應在每次實驗時臨時配置，并且僅能使用一次。質控血清的可接受范圍請見質控單。

封板紙         5片

實驗所需器材（未提供）

1） 校準的精密移液器及取樣吸頭：0~20μl、10~100μl、100~1000μl

2） 多道移液器，50~200μl

3） 洗板機及洗滌瓶

4） 37℃溫育器

5） 帶450nm濾光片的酶標儀

【儲存條件】

試劑盒應當2~8℃的環(huán)境下運輸。微孔板條一但被拆開，應當將其重新密封好。拆開了板條儲存于2~8℃的環(huán)境下時，其免疫活性可穩(wěn)定6周。

【樣本要求】

按照一般原則進行靜脈采血。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。采集的樣品存放于2~8℃的環(huán)境下時，必須在24小時內將其檢測掉。如果想將血清存放更長時間，可以將血清凍存于-20℃的環(huán)境下，避免反復凍融。

用稀釋液將病人樣品按1：51的比例進行稀釋（例如：10μl樣品+500μl稀釋液），混合均勻。稀釋好的樣品于2~8℃下可保存24小時。

【檢驗方法】

實驗開始前將所需數目的板條和所有試劑都平衡到室溫。試劑盒可分3次進行檢測，下面所述體積可用來檢測4條包被板條（32個檢測孔）。如果實驗中需使用更多板條，則體積應當相應的進行改變。

（具體檢測方法、步驟、結果計算請詳詢）

【產品性能】

期望值

建議每個實驗室都確定自己實驗室的正常值范圍。在正常范圍的研究中，所有參與研究的人群都是明顯健康的個體，正常值的范圍的個體應當在95%上。

正常范圍（血清）：＜150mU/100μl，相應的在未稀釋樣品中范圍為：＜75U/ml。

特異性

微孔中包被了純化的精子特異性抗原。目前沒有發(fā)現它與其它抗體間有交叉反應。

靈敏度

此試劑盒可檢測到的濃度為0.14mU/100μl（等于零標準品OD值的平均值減去兩倍的標準差），在未稀釋的樣品中對應為0.07U/ml。

【注意事項】

a） 試劑僅供體外診斷和專業(yè)人士使用。

b） 在檢測開始之前，仔細和完整的閱讀說明書。使用試劑盒中所提供的有效版本說明書，確保所有的程序都清楚。

c） 如果試劑盒有破壞的請與IBL公司聯系或是提交您的投訴單，但自您拿到試劑盒后*遲不超過一個星期。在檢測時請不要使用受損的試劑，并妥善保管好以備投訴時使用。

d） 按照批號和有效期，不要混合使用不同批號的試劑，也不要使用過期的試劑。

e） 遵守實驗室優(yōu)化管理規(guī)則和安全指南，穿實驗服，帶橡皮手套，有必要時請戴護目鏡。

f） 這種試劑盒中含有會傷害眼睛和皮膚的有害試劑，請閱讀材料來源和標簽獲取詳細信息。產品的材料安全數據能夠從IBL公司主頁上載可直接咨詢IBL公司獲取。

g） 根據國家生物有害物質及安全條例，所有化學藥品和準備或使用過的試劑都應當做有害物質進行處理。

h） 避免接觸終止液，以免刺激或灼燒皮膚。

i） 試劑盒中部分試劑含有疊氮化鈉作為防腐劑，一旦與皮膚或者眼睛發(fā)生接觸，立即用大量清水沖洗. 疊氮化鈉可能會與鉛和銅的管道發(fā)生反應，形成爆炸性的金屬疊氮化物。當處理試劑時，使用大量水沖洗以防止疊氮化物的形成。

j） 試劑盒中的所有試劑包括檢測過的人血清/血漿對HIV I/II，HbsAg和HCV都表現為陰性，但是試劑中會出現此類病毒（HIV I/II，HbsAg和HCV）或其他具有感染性的病原體的可能性都不能完全被排除。因此，所有的試劑在使用和處理的過程中都應當作潛在生物有害物質進行處理。

更新時間：2024/10/11 16:13:03