抗體的體外定性和定量檢測。此試劑僅供體外診斷用。
【檢測原理】
HSV-1 IgM ELISA試劑盒利用的是酶免的方法。包被板的微孔中包被了HSV-1抗原(strain MacItyre)。將已稀釋好的病人血清或即用的標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品加入到包被板相應(yīng)的微孔中。之后血清中的IgM抗體就會結(jié)合到包被板的固相抗原上。室溫溫育1小時(shí)后,用已稀釋好的洗滌液洗板以除去未結(jié)合的物質(zhì)。再加入即用型的辣根過氧酶標(biāo)記的抗人IgM,并溫育30min。溫育后洗板,之后加入TMB底物液并溫育20min,此時(shí)微孔溶液呈藍(lán)色。*后加入終止液以終止顯色反應(yīng),此時(shí)溶液由藍(lán)色變成黃色。實(shí)驗(yàn)結(jié)果*終可在酶標(biāo)儀450nm處讀取。樣品IgM抗體的濃度與溶液所顯示的顏色強(qiáng)度成正比。
【試劑盒組成成分】
1) 微孔板:12×8孔,可拆,微孔中包被了HSV-1抗原。
2) 標(biāo)準(zhǔn)品A~D:4支,2ml/支,即用。含PBS的人血清。
3) 酶聯(lián)物,1支,12ml,即用,內(nèi)含辣根過氧酶標(biāo)記的抗人IgM和蛋白緩沖液。
4) TMB底物液,1支,12ml,即用,內(nèi)含TMB底物液。
5) TMB終止液,1支,12ml,即用,內(nèi)含1M的硫酸。避免接觸終止液,以免造成著燒或刺激皮膚。
6) 樣品稀釋液,1瓶,60ml,即用,內(nèi)PBS/BSA緩沖液和0.01%四碘合汞酸甲。
7) 洗滌液,1瓶,10倍濃縮,60ml,內(nèi)含吐溫20的PBS緩沖液。
8) 封板板,2塊,可用于溫育時(shí)蓋板用。
9) 塑料袋:可重新使用的,用于儲存不用的板條。
【實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供】
1) 自動(dòng)加樣器:5;50;100和500μl(多道加樣器,可用于將試劑加入到微孔中)。
2) 蒸餾水
3) 酶標(biāo)儀
4) 洗板機(jī)
【儲存條件】
試劑盒必須貯存于2-8℃的環(huán)境中,避免高溫或太陽直射。樣品和試劑的貯存和穩(wěn)定性將在相關(guān)章節(jié)闡述。開封包被板在有效期內(nèi)穩(wěn)定,但在2-8℃環(huán)境下貯存時(shí)請把包裝袋密封好。