（德國DRG：EIA1560）
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：胰島素原ELISA試劑盒
英文名稱：Proinsulin ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】
96T
【預(yù)期用途】
該試劑盒可用于人血清、血漿中胰島素原的定量檢測
【前言簡介】
血清胰島素原的檢測可為胰島瘤的診斷提供有用的信息。在非胰島素依賴性糖尿病（NIDDM）、新近診斷的胰島素依賴性糖尿�。↖DDM）和其它臨床疾病患者的血清中，胰島素原的水平也會提高。
胰島素原是一由86個氨基酸分子組成的9390MW多肽，它主要由胰島β細(xì)胞合成，是胰島素的一個前體分子。大多數(shù)胰島素原都轉(zhuǎn)化成胰島素和C肽，并且以等量形式分泌到血液中。大約有15%的胰島素原不被轉(zhuǎn)換并直接以胰島素原的形式分泌。胰島素原的生物活性只有胰島素的10%，但其半衰期卻是胰島素的3倍。血清胰島素原的水平可以反映出胰島β細(xì)胞的生理狀態(tài)。IDDM和NIDDM疾病患者的胰島β細(xì)胞都表現(xiàn)為功能不正常。從IDDM發(fā)病一開始，病人血清胰島素原的水平就會提高，而且IDDM病人的健康同胞兄妹的血清胰島素原水平也會提高。NIDDM確診病例的血清胰島素原水平也會提高。以下患者的循環(huán)胰島素原水平也會提高：年長的病人，孕婦或肥胖性糖尿病患者，胰島瘤患者，功能性低血糖患者和高胰島素血癥患者，以及一些稀有的綜合征患者。因為胰島素原的結(jié)構(gòu)與胰島素的結(jié)構(gòu)相似，因此在胰島素檢測中胰島素原可作為免疫反應(yīng)性胰島素進行檢測。免疫反應(yīng)性胰島素一般用傳統(tǒng)的RIA方法進行檢測，但RIA方法會過高估計胰島素的水平，因為這種檢測方法所使用的抗體會與胰島素原發(fā)生交叉反應(yīng)。通過計算胰島素原和真正胰島素的分子量比率，我們可以更好的評價β細(xì)胞的功能。
【檢測原理】
DRG公司的胰島素原酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實驗（ELISA）。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合前胰島素分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性胰島素原的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育，該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結(jié)有辣根過氧化物酶的抗胰島素原抗血清。孵育后，用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。結(jié)合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中前胰島素的濃度成正相關(guān)。加入底物溶液后，顯出的顏色強度與病人樣品中胰島素原的濃度成正比。
【試劑盒成分】
1) 微量反應(yīng)板，1塊 ( 96孔) ，微孔中包被了抗胰島素原抗體。
2) 酶聯(lián)物，1支，1.2ml，11×濃縮，內(nèi)含辣根過氧酶標(biāo)記的抗胰島素原抗體。
3) 底物液，14ml (TMB)
4) 標(biāo)準(zhǔn)系列，1m/支l，6支（凍干粉），即：0；2.6；6.6；16.5；33；66pmol/l
轉(zhuǎn)換系數(shù)：106pmol/l=1ng/ml，IRR 84/611。
5) 樣品稀釋液：2ml
6) 質(zhì)控品（高/低） 2瓶 凍干 2ml 具體濃度見瓶身
7) 終止液: 0.5M的H2SO4,，14ml
8) 洗滌掖：30ml，40×濃縮
9) 酶聯(lián)物稀釋液：12ml
10) 檢測緩沖液：12ml
實驗需要器材（但試劑盒不提供）
1) 酶標(biāo)儀(450±10nm)。
2) 移液器（50μl，100μl）
3) 吸水紙
4) 標(biāo)準(zhǔn)水箱
5) 去離子水
6) 酶聯(lián)物稀釋用的10ml塑料試管
【貯存及穩(wěn)定】
未開啟的試劑在2—8℃下貯存，在有效期內(nèi)可以保持活性。不要使用過期試劑，酶聯(lián)物、底物溶液、標(biāo)準(zhǔn)品和零標(biāo)準(zhǔn)品必須在2—8℃下貯存。
微孔反應(yīng)板必須在2—8℃下貯存。一旦包裝袋被打開，必須將它小心地嚴(yán)封起來。如果包被板的包裝被打開，其免疫活性在6周內(nèi)穩(wěn)定，但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。
【樣品的采集及處理】
此檢測試劑盒要使用血清或血漿，靜脈穿刺采集全血時注意常規(guī)注意事項。不需要對樣品進行任何特殊的預(yù)處理。
在實驗開始之前，樣品可在２-８℃下可貯存24小時，如將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下，則樣品可存放更長時間。
解凍的樣本在檢測之前必須上下倒置幾次。不能使用明顯溶血﹑黃疸和明顯脂血的樣品。樣品中前胰島素濃度高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限值的必須用樣品稀釋液進行進一步稀釋。
更新時間：2024/10/11 16:13:03
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