人白介素-8定量檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián))
(96人份/48人份)
【原理】
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗人IL-8 單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的人IL-8與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人IL-8抗體,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入酶底物TMB,出現(xiàn)藍(lán)色,加終止液硫酸,顏色變黃,在450nm處測(cè)OD值,人IL-8濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中人IL-8濃度。
【試劑盒組成】
1. 酶標(biāo)板:一塊(96孔/48孔),已包被抗人IL-8單抗。
2. 樣品稀釋液:一瓶(5ml)
3. 抗體工作液:一瓶(5.5ml/2.7ml)
4. 酶標(biāo)抗體工作液:一瓶(10.5ml/5.5ml)
5. 底物液:二瓶/一瓶(5.5ml)
6. 終止液:一瓶(6ml/3ml)
7. 洗滌液(20 x):一瓶(50ml/25ml)
8. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉,2000 pg/ml):二管/一管
9. 坐標(biāo)紙:一張
10. 封板紙:一張
【樣品的準(zhǔn)備和保存】
樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。
1. 血清:用干凈試管收集血液,室溫凝固30分鐘,離心1000×g 15分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
2. 血漿:采用EDTA抗凝,抽血后30分鐘內(nèi)離心1000×g 15分鐘。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液:離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
【試劑的準(zhǔn)備】
1. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前每管中加入蒸餾水200ul溶解后即可。
2. 洗滌液:用重蒸水1:20稀釋
實(shí)驗(yàn)步驟、結(jié)果計(jì)算(詳詢)
【注意事項(xiàng)】1. 以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待查樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 底物液使用前建議先行檢查,若溶液顏色發(fā)藍(lán)則已失效,棄去。
3. 本試劑盒取出的試劑在室溫條件下使用,溶液應(yīng)輕輕搖勻后使用。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制。
4. 本試劑盒含2M硫酸,不要將它與含疊氮化鈉的廢物混在一起。
5. 板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。
6. 不同批號(hào)的試劑盒組份不能混用。
7. 正確拿酶標(biāo)板:不要接觸板的底部,否則會(huì)影響讀數(shù)。
【貯存】
本試劑盒宜置2~8℃冷藏,可保存半年。試劑盒開封后請(qǐng)短期內(nèi)做完。
【臨床意義】
在許多感染性疾病中,見(jiàn)有IL-8水平增高。如進(jìn)展期成人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)病人支氣管肺泡灌洗液中IL-8水平明顯高于非ARDS病人。早期灌洗液中出現(xiàn)IL-8可作為ARDS病情惡化的指標(biāo)性診斷指標(biāo)。細(xì)菌性尿路感染病人可見(jiàn)有IL-8升高,其水平與中性粒細(xì)胞數(shù)呈高度相關(guān)。IL-8還與感染引起的不育有關(guān),據(jù)認(rèn)為IL-8可望成為白細(xì)胞精子不育癥的診斷指標(biāo)。
據(jù)報(bào)道IL-8還參與多種疾病的病理過(guò)程,包括類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,銀屑。ㄅFぐ_),肺纖維化和石棉肺等疾病。因此檢測(cè)IL-8有臨床使用意義。
更新時(shí)間:2024/10/12 16:42:08
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