維生素B12檢測(cè)試劑盒
美國(guó)cortez 編號(hào)1739-8
前言
維生素B12是一種微量元素,是重要的生物螯合物. 基本單位為1個(gè)含鈷作為中心原子. 鈷啉環(huán)平面上方鈷離子與5,6-2甲基苯基咪唑的N-3相連. 維生素B12被小腸吸收后會(huì)形成穩(wěn)定的復(fù)合物, 存儲(chǔ)在胃液中稱為內(nèi)因子. 缺少維生素B12會(huì)間接導(dǎo)致惡性貧血. 這種疾病并不是由于維生素B12供給不足而引起的,而是由于內(nèi)因子的缺乏. 惡性貧血能通過(guò)注射高劑量的維生素B12治愈.
可通過(guò)微生物學(xué),HPLC,色譜法,在一定的時(shí)間借助特定的儀器對(duì)維生素B12的存在進(jìn)行檢測(cè). 本試劑盒,相比于傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法,能更快速(2.5-4小時(shí),包括樣品預(yù)處理)的用于維生素食物中維生素B12的定量檢測(cè).
實(shí)驗(yàn)原理
Diagnostic Automation公司的Vitamin B12 ELISA檢測(cè)試劑盒能用于維生素 B12的定量檢測(cè). 微孔內(nèi)預(yù)包被有抗維生素 B12抗體.加樣品或標(biāo)準(zhǔn)品和過(guò)氧化酶標(biāo)記維生素 B12復(fù)合物. 游離維生素 B12和酶標(biāo)物競(jìng)爭(zhēng)與抗體結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合.溫室下孵育1小時(shí)后,用稀釋洗滌液洗板去除未結(jié)合物質(zhì),加入底物液后孵育20分鐘,溶液變成藍(lán)色. 再加入終止液終止顯色,溶液變?yōu)辄S色. *后在酶標(biāo)儀處450 nm讀取吸光度值. 維生素 B12的量與樣品顯色的強(qiáng)度成反比.
注意事項(xiàng)
遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范(GLP)有利于獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果.
1實(shí)驗(yàn)前,將所有試劑平衡至室溫(20-25°C).
2使用前,將試劑倒置搖晃混勻. 避免產(chǎn)生氣泡.
3實(shí)驗(yàn)一旦開(kāi)始,所有步驟應(yīng)在指定的時(shí)間內(nèi)連續(xù)完成.
4試劑使用完后立即蓋蓋子.切勿互換瓶塞.
5使用一次性加樣吸嘴加樣,避免交叉污染.
6所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)品需一起檢測(cè),保證相同加樣條件.
7切勿混用不同批號(hào)的試劑成分.
8切勿使用過(guò)期的產(chǎn)品
健康和安全說(shuō)明
1禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙,飲食或用嘴移液.
2 戴一次性手套處理患者樣品
3避免底物液和終止液接觸皮膚和黏膜.如不慎接觸,用大量水沖洗.
4根據(jù)GLP規(guī)范使用和處理化學(xué)藥品.
試劑盒成分
試劑盒足夠96人份檢測(cè). 試劑盒存儲(chǔ)于2-8°C.有效期見(jiàn)標(biāo)簽或外包裝
1微孔反應(yīng)板 ,可分拆,12條×8孔,預(yù)包被有抗維生素B12抗體
2維生素B12標(biāo)準(zhǔn)品(0; 0.4; 1; 4; 10; 40 ng/mL), 6瓶,每瓶0.5 mL,紅色, 即用型.
3酶聯(lián)復(fù)合物(過(guò)氧化酶標(biāo)記維生素B12), 6 mL,紅色,即用型.
4底物液(TMB) : 15 mL,即用型
5終止液(0.5 M H2SO4) : 15 mL,即用型
6樣品稀釋液(PBS) :2 x 60 mL,紅色,即用型.
7洗滌液(PBS + 吐溫 20): 30 mL,10倍濃縮. 藍(lán)色. 1個(gè)單位的濃縮液+9個(gè)單位的蒸餾水稀釋.
如冷凍過(guò)程中有結(jié)晶沉淀,將濃縮液在37°C 放15分鐘.
8塑料膠膜,用于孵育過(guò)程蓋板.
9塑料袋, 未使用的微孔板置其內(nèi)保存.
10使用說(shuō)明書(shū)
更新時(shí)間:2024/10/11 16:13:03