(產(chǎn)品編號:1805-9)
1、 前言介紹
病人出現(xiàn)即時過敏反應(yīng)時通常都會伴隨出現(xiàn)循環(huán)血漿IgE抗體(針對其相應(yīng)抗原的抗體)濃度的提高。常見的過敏原有:花粉、霉菌、酵母、真菌孢子、塵螨、其它空氣吸入劑、普通食物及昆蟲叮咬,一些藥物和化妝品也可能出現(xiàn)過敏反應(yīng),不過這種情況很少見。自動診斷公司的人過敏原特異性IgE檢測試劑采用塑料包被板條,檢測板的微孔上包被了過敏原蛋白。將血清或血漿加入到微孔中,并用辣根過氧酶標(biāo)記的抗人IgE抗體檢測結(jié)合到包被板上的IgE抗體。極端敏感的TMB/過氧化物底物液用來檢測酶的量,底物的反應(yīng)量與結(jié)合到特異性抗原上的特異性IgE抗體濃度正比。此種方法已與經(jīng)典RAST方法進(jìn)行比較過。
我們可以提供400多種儲存過敏原,如果客戶要求的話,我們也可以生產(chǎn)或者得到其它的過敏原。我們通常都是使用12空的板條,每個微孔中都包被了不同的抗原。將8條這樣的板條固定在一個標(biāo)準(zhǔn)微孔板架上。換句話說,96孔的板條可以供8個病人檢測12種過敏原。我們還可以根據(jù)客戶的要求提供各種各樣的盒子。但這種要求必須與世界各地流行的過敏原的季節(jié)性和可變性相一致。
2、 應(yīng)用范圍
此試劑盒可用于人過敏原特異性IgE的定性和定量檢測。注意:在開始過敏原特異性IgE實驗前,請確定是檢測樣品中的總IgE抗體。
3、 試劑盒成分
1) 12*8的抗原包被板條
2) 辣根過氧酶包被的單克隆抗人IgE,2*12ml
3) TMB/過氧化物底物顯色液II,30ml
4) 硫酸終止液(0.5N),2*12ml
5) 15倍濃縮的洗滌液,60ml
4、 實驗步驟
注意:所有的人體液都必須當(dāng)作攜帶有HIV的傳染病試劑進(jìn)行處理。
將包被了過敏原的包被板固定在塑料板架上,并標(biāo)上相應(yīng)的病人名字或病人ID號。
1) 將所有的試劑都平衡至25℃
2) 在每一微孔中加入100ul的血清或血漿
3) 25℃下溫育2小時,但溫度不能超過30℃
4) 棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用洗滌液(見試劑準(zhǔn)備)洗板5次,*后一次洗板后在吸水紙上拍干。
5) 在每一微孔中加入100ul辣根過氧酶標(biāo)記的單克隆抗人IgE抗體。
6) 如步驟3,溫育2小時。
7) 棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,按步驟4洗板
8) 在每一微孔中加入100ul TMB/過氧化物底物液
9) 25℃下溫育30分鐘,但溫度不能超過30℃
10) 在每一微孔中加入100ul終止液(0.5N的硫酸)
11) 450nm處讀取OD值,
5、 結(jié)果說明
450nm處的OD值:
0.000-0.250 = 陰性
0.251-0.350 = I級
0.351-0.450 = II級
0.451-0.550 = III級
>0.550 = IV級
6、 試劑準(zhǔn)備
洗滌液:
實驗開始前,用14份試劑級水稀釋1份15倍濃縮的洗滌液。充分混勻并將配置好的洗滌液儲存到塑料擠瓶中。
更新時間:2024/10/11 16:13:03
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