豬肉絳蟲IgG 檢測試劑盒（ELISA法）
（德國DRG EIA3513）
預(yù)期用途
此試劑盒用于抗豬肉絳蟲血清IgG抗體定性篩查檢測
實(shí)驗(yàn)原理
包被板上包被有豬肉絳蟲囊腫液抗原，次孵育期間，已稀釋病人血清中抗體與包被抗原反應(yīng)，洗板除去未結(jié)合樣本，酶聯(lián)物加入，與已結(jié)合在包被板上的抗體結(jié)合，洗板，加入TMB底物液，發(fā)生藍(lán)色反應(yīng)，加終止液，由藍(lán)色變黃色，結(jié)果可目測或酶標(biāo)儀檢測
試劑盒組成
1. 包被板，96孔，包被了豬肉絳蟲抗原
2. 酶聯(lián)物，1瓶，11ml，過氧化物標(biāo)記的蛋白A
3. 陽性質(zhì)控，1支，1ml，稀釋的陽性兔血清
4. 陰性質(zhì)控，1支，1ml，稀釋的陰性人血清
5. 顯色液，1瓶，11ml，TMB
6. 洗滌濃縮緩沖液，1瓶，25ml，20倍濃縮，濃縮緩沖液和表面活性劑
7. 稀釋緩沖液，2瓶，30ml，蛋白緩沖液
8. 終止液，1瓶，11ml，0.73M磷酸
貯存條件
試劑，包被板和其他成分都貯存在2-8℃，裝在洗瓶呢的洗滌緩沖液可貯存在室溫下
試劑準(zhǔn)備
洗滌緩沖液：加475ml蒸餾水稀釋混勻，將稀釋好的洗滌液裝至洗瓶內(nèi)
血清樣本的采集與準(zhǔn)備
血清學(xué)樣本應(yīng)在無菌條件下采集。全血凝集，分離出血清，如樣本在幾天內(nèi)檢測，則需將樣本貯存于2-8℃，-20℃或更低溫度下可貯存3到6個月，避免使用使用熱滅活血清脂血和溶血，避免反復(fù)凍融
樣本稀釋：以1:64的稀釋比例用稀釋緩沖液稀釋樣本（5ul血清+315ul稀釋緩沖液）
實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
1. 移液器
2. 洗瓶
3. 蒸餾水和刻度量筒
4. 稀釋用試管
5. 吸水紙
6. 酶標(biāo)儀
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 取出實(shí)驗(yàn)所需板條，固定于板架上
2. #1孔加入100ul陰性質(zhì)控，#2孔加入100ul陽性質(zhì)控，剩余孔加入100ul已稀釋的樣本
注意：陽性和陰性質(zhì)控已稀釋，無需再稀釋
3. 室溫下（15-25℃）孵育10min
4. 棄去反應(yīng)液，洗滌液洗板3次
5. 每孔加2滴酶聯(lián)物
6. 室溫下孵育5min
7. 棄去反應(yīng)液，洗板3次
8. 每孔加2滴底物液
9. 室溫下孵育5Min
10. 每孔加2滴終止液
結(jié)果讀數(shù)
目測：每孔與空白對照孔相比較，用清澈，+,++,+++來表示反應(yīng)
酶標(biāo)儀：空氣讀數(shù)調(diào)零，450/650-620nm處讀數(shù)
質(zhì)控
質(zhì)控品的使用可提示試劑盒穩(wěn)定性的有效性，如果質(zhì)控品超出了可接受范圍則此試劑盒不可用
質(zhì)控期望值：
陰性：0.0-0.3
陽性：高于0.5
結(jié)果解說
陽性：吸收值高于0.3
陰性：吸收值低于0.3
陽性樣本表明病人感染了豬肉絳蟲或相關(guān)微生物
陰性樣本表明無此類抗體，或者是未感染或是免疫低下
更新時間：2024/10/12 16:42:08
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