β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)酶免試驗試劑盒
(日本IBL 27752)
簡介
阿爾茨海默病(AD)的特點是Aβ在大腦皮層內大范圍積存，因為顱內積累的Aβ對AD有高特異性，同時基因突變引起的家族性淀粉樣變性病也會導致Aβ增加。Aβ與AD的發(fā)病機理有著重要的意義。Aβ由膜蛋白-淀粉樣前體蛋白(APP)產生，N-末端裂解產生的是β分泌酶，作為蛋白酶在Aβ分泌時發(fā)揮作用，主要的β分泌酶被定義為β位淀粉樣蛋白裂解酶1(BACE1), BACE2已從此家族中分離出來
實驗原理
此試劑盒是一種夾心法的elisa試劑盒，使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑，*終溶液所顯示的顏色強度與樣品中BACE1的量成正比 檢測范圍
1.56~100ng/mL
預期用途
僅供研究使用，不能用于診斷
1. 此試劑盒用于腦提取液或細胞裂解液中BACE1的檢測
事例1
腦提取液的準備
向腦提取樣本中加入0.5ml的裂解緩沖液（10mM Tris(pH7.4),0.15M NaCl,3% TritonX-100,0.3mM PMSF），均化，冰上靜置至少3小時，4℃ 70000rmp下離心20min，取上清，然后用EIA緩沖液適當?shù)南♂專纯捎糜跈z測
事例2
細胞裂解液準備
向細胞培養(yǎng)板上加入0.5ml的裂解緩沖液（10mM Tris(pH7.4),0.15M NaCl,3% TritonX-100,0.3mM PMSF），超聲處理20秒，重復三次，15000rmp下離心15min，取上清用于檢測
2. 此試劑盒可用于人，小鼠，大鼠重組和天然的BACE1的檢測
試劑盒組成
1. 微孔板，96T，包被有抗BACE1 (N42)兔IgG
2. 標記抗體濃縮，30X，0.4ml，HRP標記的抗BACE1 (C)兔IgG Fab’
3. 標準品，0.5ml，2支，人BACE1 COS-7 裂解酶
4. EIA緩沖液，30ml
5. 標記抗體稀釋液，12ml，1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS
6. 著色劑，TMB，15ml
7. 終止液，1N硫酸，12ml
8. 洗滌緩沖濃縮液，40X，50ml，0.005%吐溫20的磷酸緩沖液
準備步驟
試驗所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標儀（450nm）
2. 移液器和槍頭
3. 有刻度的燒杯和量筒
4. 蒸餾水
5. 冰箱（4℃）
6. 坐標紙（對數(shù)-對數(shù)）
7. 吸水紙
8. 標準品稀釋管
9. 孵箱(37±1℃)
10. 洗瓶
11. 一次性試驗管
更新時間：2024/10/11 16:13:03
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