大/小鼠淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-42）試劑盒
（日本IBL 27721）
簡介
阿爾茨海默病(Alzheimer＇s disease)是由德國科學(xué)家Dr. A. Alzheime在1907年首次證實的.他的研究表明此類疾病是在老人人群引起癡呆的主要病因.在患有AD的人體中,老年斑的出現(xiàn)主要是由淀粉樣蛋白β引起的.這類由40或42(43)個氨基酸組成的多肽,是由淀粉樣前體蛋白(APP)中β分泌酶和γ分泌酶裂解形成的.APP是由695,751或770個氨基酸組成的跨膜蛋白.據(jù)報道,從APP cDNA感染的實驗小鼠的成神經(jīng)瘤細胞的上清液中發(fā)現(xiàn)有多種淀粉樣蛋白β的變異體.而且,在,Saido在老年斑內(nèi)發(fā)現(xiàn)了一種類似淀粉樣蛋白β多肽類的變異沉積物.Aβ(N3pE),這種變異分子第3個氨基殘基(谷氨基)通過分子脫水轉(zhuǎn)化成了焦谷氨酸.此試劑盒可檢測大小鼠血液（血清或血漿）樣本中Aβ42，由于它與人Aβ很難發(fā)生交叉反應(yīng)，所以它可檢測那些混有人Aβ的大小鼠Aβ42的樣本
實驗原理
此試劑盒是一種夾心法的elisa試劑盒，使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑，*終溶液所顯示的顏色強度與大鼠/小鼠樣品中Aβ42的量成正比 檢測范圍
1.56~100pg/mL（0.35~22.6pmol/L，Aβ(1-42)分子量為4418）
預(yù)期用途
此試劑盒用于血清或EDTA-血漿中大鼠/小鼠Aβ42的定量檢測
試劑盒組成
1. 微孔板，96T，包被有抗大鼠/小鼠Aβ(38-42)兔IgG
2. 標(biāo)記抗體濃縮，30X，0.4ml，HRP標(biāo)記的抗大鼠/小鼠Aβ(1-16)兔IgG Fab’
3. 標(biāo)準品，0.5ml，2支，大鼠/小鼠Aβ(1-42)
4. EIA緩沖液，30ml
5. 標(biāo)記抗體稀釋液，12ml，1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS
6. 著色劑，TMB，15ml
7. 終止液，1N硫酸，12ml
8. 洗滌緩沖濃縮液，40X，50ml，0.005%吐溫20的磷酸緩沖液
準備步驟
試驗所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 移液器和槍頭
3. 有刻度的燒杯和量筒
4. 蒸餾水
5. 冰箱（4℃）
6. 坐標(biāo)紙（對數(shù)-對數(shù)）
7. 吸水紙
8. 標(biāo)準品稀釋管
9. 洗瓶
10. 一次性試驗管
試劑準備
1. 洗滌緩沖液制備：先將洗滌濃縮液平衡至室溫，充分混勻，然后吸取50ml濃縮液與1950ml的去離子水混勻，即得。配制的洗滌液應(yīng)保存于冰箱內(nèi)，并于2周內(nèi)用完
2. 標(biāo)記抗體的制備：用標(biāo)記抗體稀釋液將標(biāo)記抗體稀釋30倍，即得。
例：如果只測一條板，8孔，則需要標(biāo)記抗體800ul（30ul的標(biāo)記抗體+870ul的標(biāo)記抗體稀釋液，混勻，使用時每孔加100ul）
此步驟在實驗前完成
剩余的標(biāo)記抗體濃縮應(yīng)裝于密封瓶內(nèi)，保存在4℃
3. 標(biāo)準品的制備：吸取0.5ml的去離子水至標(biāo)準品瓶內(nèi)，充分混勻，得到200pg/ml的大鼠/小鼠Aβ(1-42)標(biāo)準品
4. 標(biāo)準品的稀釋：準備8個試管用于標(biāo)準品的稀釋，每管加入230ul的EIA緩沖液
更新時間：2024/10/11 16:13:03
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