人類淀粉樣前體蛋白1β25(APL1β25)酶免試驗(yàn)
（日本IBL 27737）
簡介
APLP1和APLP2（類淀粉樣前體蛋白β1,2）與淀粉樣蛋白主結(jié)構(gòu)類似，近年來，有報(bào)道稱，APLP1衍生得到三種長度型的類淀粉樣前體蛋白，APL1β25, APL1β27和APL1β28，都是由腦脊液中的BACE(β-分泌酶)和γ-分泌酶產(chǎn)生，報(bào)道表明APL1與Aβ的分泌途徑類似，但它不會(huì)積存于AD患者腦內(nèi)，另外，細(xì)胞上清中的APL1β28相關(guān)產(chǎn)物與腦脊液中APL1β28檢測可用于腦內(nèi)Aβ42的候選標(biāo)記物
APL1β肽預(yù)計(jì)將成為AD研究中的生物標(biāo)記物，此試劑盒可檢測人APL1β25
實(shí)驗(yàn)原理
此試劑盒是一種夾心法的ELISA試劑盒，使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑，*終溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中APL1β25的量成正比
檢測范圍
9.38~600pg/mL
預(yù)期用途
僅供研究使用，不能用于診斷
此試劑盒用于腦脊髓液，細(xì)胞上清中人APL1β25的定量檢測
試劑盒組成
1. 微孔板，96T，包被有抗人APL1β25兔IgG
2. 標(biāo)記抗體濃縮，30X，0.4ml，HRP標(biāo)記的抗人APL1β(N)兔IgG Fab’
3. 標(biāo)準(zhǔn)品，0.5ml，2支，人APL1β25
4. EIA緩沖液，30ml，1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS
5. 標(biāo)記抗體稀釋液，12ml，1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS
6. 著色劑，TMB，15ml
7. 終止液，1N硫酸，12ml
8. 洗滌緩沖濃縮液，40X，50ml，0.005%吐溫20的磷酸緩沖液
準(zhǔn)備步驟
試驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 移液器和槍頭
3. 有刻度的燒杯和量筒
4. 蒸餾水
5. 冰箱（4℃）
6. 坐標(biāo)紙（對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)）
7. 吸水紙
8. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管
9. 洗瓶
10. 一次性試驗(yàn)管
試劑準(zhǔn)備
1. 洗滌緩沖液制備：先將洗滌濃縮液平衡至室溫，充分混勻，然后吸取50ml濃縮液與1950ml的去離子水混勻，即得。配制的洗滌液應(yīng)保存于冰箱內(nèi)，并于2周內(nèi)用完
2. 標(biāo)記抗體的制備：用標(biāo)記抗體稀釋液將標(biāo)記抗體稀釋30倍，即得。
例：如果只測一條板，8孔，則需要標(biāo)記抗體800ul（30ul的標(biāo)記抗體+870ul的標(biāo)記抗體稀釋液，混勻，使用時(shí)每孔加100ul）
此步驟在實(shí)驗(yàn)前完成
剩余的標(biāo)記抗體濃縮應(yīng)裝于密封瓶內(nèi)，保存在4℃
3. 標(biāo)準(zhǔn)品的制備：吸取0.5ml的去離子水至標(biāo)準(zhǔn)品瓶內(nèi)，充分混勻，得到1200pg/ml的人APL1β25標(biāo)準(zhǔn)品
4. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備8個(gè)試管用于標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋，每管加入230ul的EIA緩沖液
每管的濃度如下
1號(hào)管 600pg/ml
2號(hào)管 300pg/ml
3號(hào)管 150pg/ml
4號(hào)管 75pg/ml
5號(hào)管 37.5pg/ml
6號(hào)管 18.75pg/ml
7號(hào)管 9.385pg/ml
8號(hào)管 0pg/ml（試驗(yàn)樣品空白）
吸取230ul的標(biāo)準(zhǔn)品于1號(hào)管混勻，然后從1號(hào)管吸取230ul加入2號(hào)管，依次連續(xù)稀釋，標(biāo)準(zhǔn)品范圍為600~9.38pg/ml
更新時(shí)間：2024/10/11 16:13:03
溫馨提示
1.遵守中華人民共和國有關(guān)法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔(dān)一切因您的行為而直接或間接引起的法律責(zé)任。
2.請(qǐng)您真實(shí)的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對(duì)產(chǎn)品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個(gè)人或團(tuán)體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。
總訪問量：555773 管理登錄
