克氏錐蟲寡核甘酸色譜層析檢測條克氏錐蟲檢測條產(chǎn)品名稱 | 中文名稱 | 克氏錐蟲寡核甘酸色譜層析檢測條 |
| 英文名稱 | T. cruzi OligoC-Test |
| 產(chǎn)品貨號 | C-3404 |
| 產(chǎn)品規(guī)格 | 20T |
| 檢測樣本 | 血清 |
| 適應(yīng)物種 | 人 |
| 預(yù)期用途 | 檢測血清的克氏錐蟲（詳細(xì)操作看說明書）僅用于科研使用 |
| 產(chǎn)品品牌 | 比利時Coris |
| 供應(yīng)商家 | 深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司 |
克氏錐蟲檢測條檢測原理該實驗對克氏錐蟲的DNA序列進(jìn)行擴(kuò)增，使用膠體微粒和寡核苷酸探針進(jìn)行寡核苷酸層析法檢測。
分子擴(kuò)增是通過現(xiàn)成的混合物，包含了內(nèi)部質(zhì)控的模板（IC），質(zhì)控模板的擴(kuò)增使用的底物與克氏錐蟲目標(biāo)區(qū)域DNA是一致的，不過包含了一個特殊內(nèi)置序列，該序列可以被質(zhì)控探針檢測到。聚合酶和DNA模板都必須增加到混合物中。
當(dāng)DNA擴(kuò)增完成了，內(nèi)部質(zhì)控和克氏錐蟲擴(kuò)增物就會與緩沖溶液混合，然后檢測條（Oligo-strip）插進(jìn)溶液中，擴(kuò)增物與金色特異性探針位于檢測條（Oligo-strip）底部。擴(kuò)增物在毛細(xì)管作用下各自向質(zhì)控和錐體蟲捕獲區(qū)域聚集，如果相符合的擴(kuò)增物出現(xiàn)，那么粉紅色或者紫色帶就會在捕獲區(qū)域形成。過剩的金色探針與補(bǔ)充探針雜交涂布在卡片兩面的的頂部作為一個質(zhì)控移動。
克氏錐蟲檢測條成分每個克氏錐蟲寡核苷酸層析法檢測盒子都包含一個小盒子，一旦收到就應(yīng)該存放在-20°C。
A.克氏錐蟲擴(kuò)增-試劑（小盒子），保存在-20°C。
1.克氏錐蟲擴(kuò)增-混合物（藍(lán)帽，SUL-3804，兩瓶C-3404，一瓶C-3704），存放在-20°C的預(yù)PCR的地方每個混合物包含了引物，dNTPs，緩沖液和內(nèi)部質(zhì)控模板。
避免對克氏錐蟲擴(kuò)增-混合物反復(fù)凍融超過兩次，否則會降低靈敏度。如果需要多次試驗，克氏錐蟲擴(kuò)增-混合物應(yīng)分裝放置在-20°C保存。即使混合物會與其他試劑放置室溫下，但接收時應(yīng)該放在到-20°C�？耸襄F蟲擴(kuò)增-混合物包含了dUTP，遺留污染可以通過尿嘧啶-DNA糖基化酶進(jìn)行清除。
2.克氏錐蟲擴(kuò)增-質(zhì)控（一瓶，BUL-4004），保存在-20°C。
克氏錐蟲擴(kuò)增-質(zhì)控是作為克氏錐蟲擴(kuò)增-混合物一個陽性質(zhì)控。它以干燥的形式放置在一個螺旋蓋瓶里。一旦接收就保存在-20°C，單獨放置。（看步驟VII.B.）
B.克氏錐蟲寡核苷酸層析法檢測（大盒子），保存在室溫下（4°C-30°C）。
1.克氏錐蟲寡核苷酸層析法檢測條（分別包裝，SUL-3204，用于C-3404的20條卡片，用于C-3704的10條卡片），保存在室溫下（4°C-30°C）每張克氏錐蟲寡核苷酸層析法檢測條兩面都有感應(yīng)的，捕獲試劑在硝化纖維底部。上部的硝化纖維也可以感應(yīng)（兩面），作為一個寡核苷酸探針的補(bǔ)充。第二條感應(yīng)線是作為移動質(zhì)控線。
探針偶聯(lián)物是由寡核苷酸結(jié)合金色膠粒組成的。這些探針偶聯(lián)物是干燥的，位于卡片的底部。
卡片的兩面是不同的（藍(lán)色的面“T. cruzi”，是克氏錐蟲檢測面，綠色面“Internal control”是質(zhì)控面）�？耸襄F蟲寡核苷酸層析法檢測條每個袋子有一個干燥劑，保存在室溫下（4-30°C）。
2.配有塞子的實驗管（20），保存在PCR的環(huán)境中
3.緩沖液（2ml一瓶，SUL-3702），保存在室溫下（4°C - 30°C）PCR環(huán)境中。
用于寡核苷酸檢測的緩沖液包含了NaN3（防腐劑），保存在室溫下。
4.說明書
克氏錐蟲檢測所需材料（試劑盒未提供）■移液管
■0.2ml或者0.5mlPCR反應(yīng)試管
■變溫箱
■礦物油（如果變溫箱沒有加熱板）
■用于離心機(jī)上2ml的試管
■熱反應(yīng)的DNA聚合酶（5U/ul）
■一次性的手套。
■用于干加熱機(jī)（或者水浴鍋）13mm直徑的試管。
■PCR級別的水克氏錐蟲檢測條檢測步驟1.將40ul已預(yù)熱的緩沖液加入到已預(yù)熱的試管底部并放置到加熱器里。
2.使用移液管加入40ul的PCR產(chǎn)物并替換實驗管放置在加熱器里
3.直接將檢測條浸泡到實驗管里并用塞子塞緊實驗管。
4.在加熱器上55°C溫育5分鐘。
5.在檢測條依然濕潤時查看結(jié)果，因為當(dāng)檢測條干燥時會出現(xiàn)一些背景線條。
6.溶劑在檢測條上移動完后不要打開實驗管，避免遺留污染物，在分析結(jié)果之后丟棄實驗管和 檢測條。克氏錐蟲檢測條產(chǎn)品性能檢測限
純DNA
1 fg/T （相當(dāng)于0.005寄生蟲/PCR）
血液寄生蟲
每180ul血液1個寄生蟲
靈敏度
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更新時間：2024/10/11 16:13:03
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