乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)試劑盒(ELISA法)
乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品詳情 中文名稱(chēng) | 乙酰膽堿受體抗體測(cè)定試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Medizym® anti-AChR |
產(chǎn)品貨號(hào) | 3104 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T |
檢測(cè)樣本 | 血清 |
適應(yīng)物種 | 人 |
預(yù)期用途 | 用于定量測(cè)定人血清中乙酰膽堿受體抗體(AChR Ab)濃度 |
儲(chǔ)存條件 | 2~8℃ |
產(chǎn)品品牌 | 德國(guó)GA |
供應(yīng)商家 | 深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司 |
乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)試劑盒用于定量測(cè)定人血清中乙酰膽堿受體抗體(AChR Ab)濃度。乙酰膽堿受體(AChR)的自身抗體是重癥肌無(wú)力神經(jīng)肌肉接頭衰竭的原因,這是一種神經(jīng)肌肉疾病,導(dǎo)致肌肉無(wú)力和易疲勞。 這些抗體的測(cè)量在疾病診斷和管理中具有相當(dāng)大的價(jià)值。
乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理測(cè)定系統(tǒng)取決于人血清中AChR Ab與AChR上類(lèi)似位點(diǎn)結(jié)合的能力,如各種單克隆抗體,如MAb1(包被在ELISA板孔上)和/或MAb2和/或MAb3(用生物素標(biāo)記)。 在不存在AChR Abs的情況下,在板孔上包被的MAb1,AChR和MAb2與MAb3生物素之間形成復(fù)合物。 然后通過(guò)添加鏈霉抗生物素蛋白過(guò)氧化物酶(SA-POD),底物(TMB)和終止溶液來(lái)檢測(cè)結(jié)合的MAb2和MAb3生物素。 在AChR Abs存在下,MAb1-AChR-MAb2 / MAb3生物素復(fù)合物的形成受到抑制,導(dǎo)致結(jié)合的SA-POD較少,450nm處的*終吸光度降低。 測(cè)試血清中AChR Abs濃度越高,MAb生物素結(jié)合的抑制越大。
乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)試劑盒組成成分 名稱(chēng) | 數(shù)量 | 成分 |
微孔板 | 12 X 8 | 包被有ACHR的單克隆抗體 |
濃縮緩沖液 | 100ml | 可稀釋為1000ml |
(SA-POD) | 1x 0.7ml | 可稀釋為14.0ml |
底物液 | 1×15ml | 即用型 |
終止液 | 1×10ml | 即用型 |
SA-POD稀釋液 | 15ml | 即用型 |
MAb-生物素 | 3瓶 凍干粉 | AChR單克隆抗體(MAb2,MAb3) |
生物素 稀釋液 | 15ml | 即用型 |
AChR F | 3×0.7ml | 凍干粉,胎兒類(lèi)型AChR |
AChR A | 3×0.5ml | 凍干粉,成人類(lèi)型ACHR |
AChR 稀釋液 | 5ml | 即用型 |
C1 陰性質(zhì)控 | 3ml | 即用型 |
CIICIII 陽(yáng)性質(zhì)控 | 2×0.7ml | 即用型 |
1-4標(biāo)準(zhǔn)品 | 4×0.7ml | 即用型 |
乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟1.將100μl陰性對(duì)照(CI),校準(zhǔn)物(1-4),陽(yáng)性對(duì)照(CII,CIII)和測(cè)試血清移入單獨(dú)的1.5ml Eppendorf管中,并做好相應(yīng)標(biāo)記。
2.將25μl胎兒和成人型AChR混合物(K + L)移入每個(gè)Eppendorf管(來(lái)自步驟1)并密封管。確保所有液體都在每個(gè)管的底部(如果有疑問(wèn),將離心管在微量離心機(jī)中以10-15,000g離心10秒鐘)。輕輕渦旋并在2-8℃下孵育過(guò)夜(16-20小時(shí))。
3.使用渦旋混合器輕輕混合來(lái)自步驟2的每個(gè)樣品-AChR混合物管。根據(jù)測(cè)定方案,將50μl每種樣品-AChR混合物移液到相應(yīng)的孔(A)中,復(fù)孔測(cè)定。
4.蓋上平板并在室溫(18-25℃)下孵育60分鐘,同時(shí)以> 500rpm振搖。
5.通過(guò)使用洗板機(jī),或通過(guò)在合適的容器上快速翻轉(zhuǎn)板孔框架來(lái)?xiàng)壢グ鍍?nèi)溶液。用300μl洗滌溶液(稀釋的B溶液)洗滌孔3次。在干凈的吸水紙上輕輕敲打倒置的板孔以去除多余的洗滌液。
6.向每個(gè)孔中加入50μl重構(gòu)的MAb-生物素溶液(由H和J制備)。
7.蓋上平板并在室溫(18-25℃)下孵育60分鐘,同時(shí)以> 500rpm振搖。
8.通過(guò)使用洗板機(jī),或通過(guò)在合適的容器上快速翻轉(zhuǎn)板孔框架來(lái)?xiàng)壢グ鍍?nèi)溶液。用300μl洗滌溶液(稀釋的B溶液)洗滌孔3次。在干凈的吸水紙上輕輕敲打倒置的板孔以去除多余的洗滌液。
9.向每個(gè)孔中加入100μl重構(gòu)的SA-POD(由D和G制備)。
10.蓋上平板并在室溫(18-25℃)下孵育30分鐘,同時(shí)以> 500rpm振搖。
11.通過(guò)使用洗板機(jī),或通過(guò)在合適的容器上快速翻轉(zhuǎn)板孔框架來(lái)?xiàng)壢グ鍍?nèi)溶液。用300μl洗滌溶液(稀釋的B溶液)洗滌孔3次。手工洗板情況下,額外多一個(gè)洗滌步驟,即在*后一次洗板時(shí),用純凈水洗板一出去任何的泡沫。在干凈的吸水紙上輕輕敲打倒置的板孔以去除多余的洗滌液。
12.向每個(gè)孔中加入100μl底物溶液(E)并立即搖動(dòng)。
13.在室溫下黑暗中孵育30分鐘。
14.向每個(gè)孔中加入50μl終止溶液(F)。搖動(dòng)板5秒鐘。
15.在添加終止溶液后30分鐘內(nèi)讀取450nm處的光密度,以620或690nm作為參考波長(zhǎng)。 掃碼關(guān)注微信公眾號(hào),了解更多精彩資訊!
更新時(shí)間:2024/10/11 16:13:03
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