類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法）

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法）

英文名稱：IGFBP-3 ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預(yù)期用途】

試劑盒用于體外定量測(cè)定人血清中胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3（IGFBP-3）的含量。

【前言簡(jiǎn)介】

胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）系統(tǒng)是正常體內(nèi)生長(zhǎng)和再生的主要調(diào)節(jié)因子，影響細(xì)胞增殖，分化和細(xì)胞凋亡。 此外，IGF-系統(tǒng)似乎改變胰島素敏感性和長(zhǎng)期性葡萄糖代謝。 許多流行病學(xué)，實(shí)驗(yàn)和臨床資料表明，IGF-系統(tǒng)也涉及幾種常見癌癥的發(fā)展以及常見疾病如動(dòng)脈粥樣硬化和2型糖尿病等。

IGF家族由一系列密切相關(guān)的多肽組成，其包括兩個(gè)主要促進(jìn)生長(zhǎng)的多肽，IGF-I和IGF-II，6種特異性高親和力IGF結(jié)合蛋白（IGFBP-1至-6）和一個(gè)大的非IGF結(jié)合糖蛋白，“酸不穩(wěn)定亞單位”（ALS）。

IGFBP-3是豐富的IGF結(jié)合蛋白，占健康人循環(huán)IGF結(jié)合能力的75％以上。 IGFBP-3與IGFBP-5共享功能特性，因?yàn)閮煞N肽都能與ALS和IGF-I或-II的形成高分子量約150千道爾頓的三元復(fù)合物。 然而，IGFBP-5循環(huán)濃度比IGFBP-3低得多，而在健康受試者中，三元復(fù)合物攜帶多達(dá)90％的IGFBP-3但只有約50％的IGFBP-5。

IGFBP被認(rèn)為是IGF-載體蛋白，穩(wěn)定血漿IGF水平并控制IGF從循環(huán)中流出至血管外隔室。此外，人們認(rèn)為 IGFBP復(fù)合IGF在生物學(xué)上或多或少無(wú)活性，被剝奪了與IGF-1受體相互作用的能力。但是，很快人們就發(fā)現(xiàn)，在一些實(shí)驗(yàn)設(shè)置中，IGFBP激活而不是抑制IGF-I介導(dǎo)的作用，因此，IGFBP通常被稱為IGF-1生物活性的調(diào)節(jié)劑。另外，大多數(shù)的IGFBP，特別是IGFBP-3，發(fā)揮著IGF-I和IGF-I受體的獨(dú)立作用，可能涉及位于細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的特定受體間的相互作用。例如，IGFBP-3現(xiàn)在被認(rèn)為是作為抗癌分子服務(wù)的，它可以明顯防止幾種常見的癌癥，同時(shí)IGFBP-3在培養(yǎng)的脂肪細(xì)胞中對(duì)胰島素信號(hào)的傳導(dǎo)作用也被提出。

三元復(fù)合物的轉(zhuǎn)換非常緩慢，一天中IGFBP-3的血漿濃度始終保持穩(wěn)定，而不受短期營(yíng)養(yǎng)變化的影響。 因此，IGFBP-3的水平可以由一個(gè)單獨(dú)測(cè)量確定。 GH是IGFBP-3以及IGF-I和ALS的主要調(diào)節(jié)因子，因此，三種多肽水平在青春期生長(zhǎng)期間增加，其后隨著年齡的增長(zhǎng)逐漸下降。 在兒童中，IGFBP-3已顯示與24小時(shí)GH分泌相關(guān)，因此，IGFBP-3可能對(duì)兒童GH缺陷的診斷有幫助。

【檢測(cè)原理】

GFBP3-ELISA是固相酶擴(kuò)增敏感性對(duì)微孔板進(jìn)行的免疫測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品與包被的捕獲單克隆抗體（MAb 1）和用辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的單克隆抗體（MAb 2）反應(yīng)。經(jīng)過孵育形成一個(gè)三明治結(jié)構(gòu)：包被的MAb 1 - -人IGFBP3--MAb 2-HRP，洗滌微孔板以除去未結(jié)合的酶標(biāo)記抗體。通過顯色測(cè)量結(jié)合的酶標(biāo)記抗體反應(yīng)。加入顯色溶液（TMB）并孵育。添加終止液終止反應(yīng)，然后在適當(dāng)波長(zhǎng)下讀取微孔板。被測(cè)物含量的顯色程度與人IGFBP3濃度成正比。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品中IGFBP3濃度通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可直接讀取。

【試劑盒組成成分】

注意：

用稀釋液做0標(biāo)準(zhǔn)品。

校準(zhǔn)品是針對(duì)NIBSC / WHO重組的IGFBP-3的標(biāo)準(zhǔn)化物質(zhì)，參考試劑編號(hào)93/560。

所需材料（未提供）

高質(zhì)量的蒸餾水

50ul,100ul,1ml的微量移液器（推薦使用一次性塑料槍頭的移液器）

稀釋樣品的塑料管

旋渦攪拌器

磁力攪拌器

酶標(biāo)儀（450或者650nm）

洗板機(jī)