糖類抗原72-4（CA72-4）檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

ELISA操作終止及讀板過(guò)程常見(jiàn)問(wèn)題及解答

1. 終止液加樣時(shí)產(chǎn)生氣泡；
2. 終止不均勻
3. 酶標(biāo)板板底臟污
4. 讀數(shù)波長(zhǎng)錯(cuò)誤，
5. 終止液加入后，長(zhǎng)時(shí)間不讀板

解決辦法：

1. 加終止液時(shí)，應(yīng)避免起泡，以免造成假陽(yáng)性
2. 終止液加入后應(yīng)輕輕振板，使終止液與板孔內(nèi)溶液充分混勻；
3. 酶標(biāo)板讀數(shù)前，應(yīng)輕輕拭去板底的水跡和污物，保證板底干潔，以免影響讀數(shù)；
4. 應(yīng)根據(jù)底物液選擇合適的讀數(shù)波長(zhǎng)，如TMB一般選擇450nm波長(zhǎng)，PNPP一般選擇405nm波長(zhǎng)等；

加入終止液后，應(yīng)盡快讀板，酶標(biāo)板內(nèi)顏色會(huì)隨著終止時(shí)間的延長(zhǎng)而變淡，因此，*是在終止后10分鐘內(nèi)讀板。

通用名稱：糖類抗原72-4檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：TM-CA72-4ELISA
產(chǎn)品貨號(hào)：EIA5071
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測(cè)樣本：血清、血漿
公司品牌：德國(guó)DRG
儲(chǔ)存條件：2-8℃
檢測(cè)方法：ELISA方法
預(yù)期用途：用于在人體血清或血漿中定量檢測(cè)腫瘤相關(guān)抗原CA72-4 ，僅供體外診斷使用，可用于臨床使用。
參考價(jià)格：詢價(jià)
供應(yīng)商家：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司 

TM-CA72-4ELISA檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途
      TM-CA72-4ELISA試劑盒用于在人體血清或血漿中定量檢測(cè)腫瘤相關(guān)抗原CA72-4 ，僅供體外診斷使用。

糖類抗原72-4前言簡(jiǎn)介
       CA72-4(癌抗原72-4)*初被描述為由B72.3識(shí)別的抗原因子。B72.3是由相應(yīng)的原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移后的膜萃取物免疫雜交生產(chǎn)的鼠單克隆抗體。CA72-4被證實(shí)是1MDa的粘液樣糖蛋白，合成物稱為T(mén)AG72（腫瘤相關(guān)抗原72）。TAG72蛋白的分子量為48KD. 血清和血漿中的CA72-4的水平升高見(jiàn)于某些惡性疾病，包括胰、胃、膽、結(jié)腸、乳腺、卵巢、子宮頸、子宮內(nèi)膜的腫瘤。它對(duì)胃腸道和卵巢的腫瘤有很高的診斷學(xué)的敏感性。盡管在一些良性的疾病如風(fēng)濕病和卵巢囊腫也發(fā)現(xiàn)有CA72-4的升高，但是臨床研究表明，對(duì)于胃腸道和卵巢腫瘤，特異性診斷高達(dá)95％。CA72-4的水平和腫瘤的大小及分級(jí)緊密關(guān)聯(lián)。CA72-4是胃腸道腫瘤的病人選擇治療學(xué)的監(jiān)測(cè)和隨后的護(hù)理的指標(biāo)。另外合適的指標(biāo)是CA199和CEA，另外，CA72-4是卵巢腫瘤的病人選擇治療學(xué)的監(jiān)測(cè)和隨后的護(hù)理的可靠性指標(biāo)，尤其是對(duì)于CA125陰性的病人。

TM-CA72-4ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
       DRG公司的TM-CA 72-4酶免實(shí)驗(yàn)是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）。反應(yīng)板上的微檢測(cè)孔包被有能結(jié)合CA72-4分子上*抗原位點(diǎn)的單克隆小鼠抗體。一份含有內(nèi)源性CA72-4的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進(jìn)行孵育，該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結(jié)有辣根過(guò)氧化物酶的抗CA72-4抗體。孵育后，用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。結(jié)合上的辣根過(guò)氧化物酶的總量與樣本中CA72-4的濃度成正相關(guān)。加入底物溶液后，顯出的顏色強(qiáng)度與病人樣品中CA72-4的濃度成正比。

糖類抗原72-4檢測(cè)試劑盒組成成分
●微孔板：12×8孔，可拆，微孔中包被抗CA72-4 單克隆抗體。
●標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)品0-4）：5支 0.5ml，即用，濃度為0,3，20，50，100U/ml，內(nèi)含無(wú)mercury防腐劑。
●質(zhì)控高&低：2支 凍干粉，0.5ml，見(jiàn)“試劑準(zhǔn)備”，質(zhì)控品的濃度及范圍請(qǐng)見(jiàn)試劑瓶標(biāo)簽或質(zhì)控單。內(nèi)含無(wú)mercury防腐劑。
●樣品稀釋液：一支，3ml，即用，內(nèi)含無(wú)mercury防腐劑。
●酶聯(lián)物：1支 1.4ml，10倍濃縮，標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶的抗CA72-4抗體，內(nèi)含無(wú)汞防腐劑。
●酶聯(lián)物稀釋液：一支，14ml，即用型，含無(wú)汞防腐劑。
●底物液：一支 14ml，即用。
●終止液：0.5M的硫酸，一支 14ml，即用，避免接觸終止液，以免刺激或著燒皮膚。
●洗滌液（40X）：一支 30ml.注意：用于樣品稀釋的樣品稀釋液應(yīng)視需要而定。

糖類抗原72-4檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟
●將實(shí)驗(yàn)所需數(shù)目的板條固定在板架上。
●用一次性吸嘴將20µL的標(biāo)準(zhǔn)品﹑質(zhì)控品和樣品加入相應(yīng)的檢測(cè)孔中。
●每孔加入100µL的新鮮配制的酶聯(lián)物。*混合十秒，在此步驟里，充分搖勻十分重要。
●在室溫下溫育120分鐘。
●快速棄去檢測(cè)孔中的內(nèi)含物，每孔用400µL洗滌液洗板五次，在吸水紙上用力拍板以除去殘留的液體。
●每孔加入100µL的底物液。
●在室溫下溫育30分鐘。
●每孔加入100µL的終止液終止反應(yīng)。
●在加終止液后十分鐘內(nèi)，室溫下，于450±10nm處讀取吸光率。

糖類抗原72-4檢測(cè)試劑盒儲(chǔ)存條件
       TM-CA72-4ELISA試劑盒在2-8℃下儲(chǔ)存，在保質(zhì)期內(nèi)保持其穩(wěn)定性。不要使用過(guò)期的試劑。所有開(kāi)啟了的試劑都應(yīng)在2-8℃下儲(chǔ)存，2個(gè)月內(nèi)有效。

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