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多巴胺試劑盒
(德國IBL:貨號(hào):RE59161)
通用名稱:多巴胺ELISA試劑盒
英文名稱:dopamineELISA
產(chǎn)品規(guī)格:96T
多巴胺試劑盒預(yù)期用途:
可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測(cè),可手動(dòng)操作,也可自動(dòng)操作。進(jìn)一步的研究表明:此試劑盒還可用于組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。
前言簡(jiǎn)介:
兒茶酚胺類激素腎上xian素、去甲腎上xian素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織,并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中,兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物間甲腎上xian素和去甲變腎上xian素的分泌量都會(huì)增加,因而這些激素可用于疾病的診斷。所以,這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷,當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟,所以用戶可使用所有動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。此試劑盒可檢測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物,所有動(dòng)物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同。
檢測(cè)原理:
利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體。在溫育時(shí)間之內(nèi),加入的抗體可直接與抗原分子上的一個(gè)表位結(jié)合。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗(可與抗原分子上的不同表位結(jié)合)在包被孔中溫育。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定。
貯存與穩(wěn)定性:
運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定,前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。
實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒不提供):
1、移液器(10;10-100;100-1000μL)
2、軌道搖床(200-900rpm)
3、旋渦混合器
4、帶儲(chǔ)器的8通道移液器
5、洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)
6、酶標(biāo)儀,405nm(參考波長(zhǎng):620-650nm)
7、雙蒸水或去離子水
8、吸水紙,取樣吸頭,計(jì)時(shí)器
9、樣品稀釋用試管
檢測(cè)步驟:
1、在一次性試管內(nèi),用釋放緩沖液以1:51的比例稀釋提取的標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和尿液樣本(如:10ul提取樣本+500ul的釋放緩沖液)
2、在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液,輕輕振蕩。
3、將預(yù)稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和尿液樣本加100ul至相應(yīng)孔內(nèi)血漿樣本直接加100ul于相應(yīng)孔內(nèi)在此步驟中,將槍頭直接觸碰COMT酶溶液,顏色會(huì)轉(zhuǎn)為粉紅色,輕輕混勻。
4、每孔中加入50μL多巴胺抗血清。
5、蓋板。在振蕩器(400-600rpm)上18-25℃的環(huán)境下溫育120min
6、棄去孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。
7、每孔加入100μL酶聯(lián)物
8、蓋板。在軌道搖床(400-600rpm)上18-25℃的環(huán)境下溫育60min
9、棄去孔內(nèi)反應(yīng)液,用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。
10、加底物液和終止液時(shí),其時(shí)間間隔應(yīng)相同
11、每孔加入200μL底物液
12、在軌道搖床(400-600rpm)上18-25℃的環(huán)境下溫育40min。如果自動(dòng)操作時(shí)的溫度超過25℃時(shí),則應(yīng)相應(yīng)的將溫育時(shí)間縮短至30min。
13、每孔加入50μLPNPP終止液以終止底物反應(yīng),輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。
14、加終止液后60min之內(nèi)405nm處讀取OD值。(參考波長(zhǎng):620-650nm)
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更新時(shí)間:2024/10/11 16:13:16
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人骨橋蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒27158型號(hào):
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