糖類抗原72-4(CA72-4)測(cè)定試劑盒
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:糖類抗原72-4(CA72-4)測(cè)定試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:TM-CA72-4 ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】
96人份/盒
【檢測(cè)原理】
本產(chǎn)品用于體外定量檢測(cè)血清和血漿中的CA72-4(TAG-72),僅供體外診斷使用。
【臨床意義】
CA72-4(癌抗原72-4)*初被描述為由B72.3識(shí)別的抗原因子。B72.3是由相應(yīng)的原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移后的膜萃取物免疫雜交生產(chǎn)的鼠單克隆抗體。CA72-4被證實(shí)是1MDa的粘液樣糖蛋白,合成物稱為TAG72(腫瘤相關(guān)抗原72)。TAG72蛋白的分子量為48KD. 血清和血漿中的CA72-4的水平升高見(jiàn)于某些惡性疾病,包括胰、胃、膽、結(jié)腸、乳腺、卵巢、子宮頸、子宮內(nèi)膜的腫瘤。它對(duì)胃腸道和卵巢的腫瘤有很高的診斷學(xué)的敏感性。盡管在一些良性的疾病如風(fēng)濕病和卵巢囊腫也發(fā)現(xiàn)有CA72-4的升高,但是臨床研究表明,對(duì)于胃腸道和卵巢腫瘤,特異性診斷高達(dá)95%。CA72-4的水平和腫瘤的大小及分級(jí)緊密關(guān)聯(lián)。CA72-4是胃腸道腫瘤的病人選擇治療學(xué)的監(jiān)測(cè)和隨后的護(hù)理的指標(biāo)。另外合適的指標(biāo)是CA199和CEA,另外,CA72-4是卵巢腫瘤的病人選擇治療學(xué)的監(jiān)測(cè)和隨后的護(hù)理的可靠性指標(biāo),尤其是對(duì)于CA125陰性的病人。
【檢測(cè)原理】
DRG公司的TM-CA 72-4酶免實(shí)驗(yàn)是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測(cè)孔包被有能結(jié)合CA72-4分子上獨(dú)特抗原位點(diǎn)的單克隆小鼠抗體。一份含有內(nèi)源性CA72-4的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進(jìn)行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結(jié)有辣根過(guò)氧化物酶的抗CA72-4抗體。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。結(jié)合上的辣根過(guò)氧化物酶的總量與樣本中CA72-4的濃度成正相關(guān)。加入底物溶液后,顯出的顏色強(qiáng)度與病人樣品中CA72-4的濃度成正比。
【主要組成成分】
1) 微孔板:12×8孔,可拆,微孔中包被抗CA72-4 單克隆抗體。
2) 標(biāo)準(zhǔn)品(標(biāo)準(zhǔn)品0-4):5支 0.5ml,即用,濃度為0,3,20,50,100U/ml,內(nèi)含無(wú)水銀防腐劑。
3) 質(zhì)控高&低:2支 凍干粉,0.5ml,見(jiàn)“試劑準(zhǔn)備”,質(zhì)控品的濃度及范圍請(qǐng)見(jiàn)試劑瓶標(biāo)簽或質(zhì)控單。內(nèi)含無(wú)水銀防腐劑。
4) 樣品稀釋液:一支,3ml,即用,內(nèi)含無(wú)水銀防腐劑。
5) 酶聯(lián)物:1支 1.4ml,10倍濃縮,標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶的抗CA72-4抗體,內(nèi)含無(wú)汞防腐劑。
6) 酶聯(lián)物稀釋液:一支,14ml,即用型,含無(wú)汞防腐劑。
7) 底物液:一支 14ml,即用。
8) 終止液:0.5M的硫酸,一支 14ml,即用,避免接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。
9) 洗滌液(40X):一支 30ml.
注意:用于樣品稀釋的樣品稀釋液應(yīng)視需要而定。
實(shí)驗(yàn)需要器材(但試劑盒不提供)
1) 酶標(biāo)儀(450±10nm)。
2) 移液器
3) 吸水紙
4) 蒸餾水
5) 計(jì)時(shí)器
6) 坐標(biāo)紙或是數(shù)據(jù)處理軟件
【儲(chǔ)存條件】
未開(kāi)啟的試劑在2-8℃下儲(chǔ)存,在保質(zhì)期內(nèi)保持其穩(wěn)定性。不要使用過(guò)期的試劑。所有開(kāi)啟了的試劑都應(yīng)在2-8℃下儲(chǔ)存,2個(gè)月內(nèi)有效。
【樣本要求】
本實(shí)驗(yàn)可使用血清或血漿(使用EDTA、肝素或檸檬酸抗凝)樣品,不要使用溶血﹑脂血﹑黃疸的樣品。注意:含疊氮鈉的樣品不能用于此實(shí)驗(yàn)。
樣品采集
血清:
靜脈采血,允許使用凝血,在室溫下用離心法分離血清。全血未完全凝固前請(qǐng)勿離心,接受了抗凝劑治療的病人血液可能需要更長(zhǎng)的凝血時(shí)間。
血漿:
將全血收集到含有抗凝劑的離心管內(nèi),收集后馬上用離心法分離。
樣品的儲(chǔ)存
樣品蓋好蓋子后,可在實(shí)驗(yàn)前2-8℃下儲(chǔ)存5天,要更長(zhǎng)時(shí)間(至多12個(gè)月)儲(chǔ)存,應(yīng)在-20℃下凍存。在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前應(yīng)避免反復(fù)凍融樣品。
樣品的稀釋(詳詢)
檢測(cè)方法(詳詢)
檢測(cè)步驟(詳詢)
【結(jié)果計(jì)算】
1) 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品﹑質(zhì)控品和病人樣品的平均吸光率。
2) 以吸光率為Y軸,濃度為X軸,按照從標(biāo)準(zhǔn)品中獲得的平均吸光率和其相對(duì)應(yīng)的濃度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3) 利用樣品的平均吸光率,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上得出其相應(yīng)的濃度值。
4) 自動(dòng)方法:使用立方函數(shù)﹑四參數(shù)模式或雙對(duì)數(shù)的計(jì)算機(jī)程序可得到結(jié)果。
5) 樣品的濃度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。樣品的濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品的濃度則需進(jìn)一步稀釋。在計(jì)算樣品的濃度的時(shí)候,要乘以稀釋倍數(shù)。
下面是CA72-4 ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線的典型例子。
標(biāo)準(zhǔn)品 | 吸光率(450nm) |
零標(biāo)準(zhǔn)品(0 U/ml) | 0.08 |
標(biāo)準(zhǔn)品1(3 U/ml) | 0.19 |
標(biāo)準(zhǔn)品2(20 U/ml) | 0.59 |
標(biāo)準(zhǔn)品3(50 U/ml) | 1.16 |
標(biāo)準(zhǔn)品4(100 U/ml) | 2.02 |
【期望值】
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須建立自己的正常值。
以下是利用DRG公司的糖類抗原72-4(CA72-4)測(cè)定試劑盒(酶聯(lián)免疫法)EIA-5071對(duì)正常成年人測(cè)試所得到的結(jié)果:
測(cè)試人群 | 有效例數(shù) | 中間值 | 平均值 | 5th-95th |
健康人群 | 89 | 2.0 U/mL | 2.3 U/mL | 0 U/mL-6.5 U/mL |
【注意事項(xiàng)】
1) 在使用前所有試劑和樣品均需平衡至室溫,所有試劑要充分混合但不要起泡。
2) 一旦實(shí)驗(yàn)開(kāi)始,所有步驟都必須進(jìn)行到底而不能中斷。
3) 對(duì)每種試劑﹑標(biāo)準(zhǔn)品和樣品使用一次性的吸嘴,以避免交叉污染。
4) 吸光率決定于溫育時(shí)間和溫度,在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前,建議準(zhǔn)備好所有的試劑,將需要檢測(cè)的微孔板固定在板架上,這些步驟保證每次加液步驟所需時(shí)間相同而沒(méi)有中斷。
5) 按照一般的規(guī)律,酶反應(yīng)時(shí)間與溫育時(shí)間和溫度成線性比例。
更新時(shí)間:2024/10/12 16:42:09