內(nèi)皮素-1 ELISA試劑盒
(日本IBL:27165)
1、前言說明
內(nèi)皮素-1(一種21個氨基酸分子組成的多肽)是目前所知的*有效的血管收縮劑。1985年Rubanyi研究小組發(fā)現(xiàn)了一種多肽并將其命名為內(nèi)皮源性收縮因子(EDCF),之后Yanagisawa將其分離、測序、克隆,并命名為內(nèi)皮素,而且認(rèn)為它是*有效的血管收縮劑,這使得人們了解到它更多的生理功能。內(nèi)皮素-1(ET-1)是哺乳動物三種血管活性肽家族中的一種,這三種血管活性肽還包括內(nèi)皮素-2和內(nèi)皮素-3。這兩種相關(guān)多肽的2和6號位的氨基酸與ET-1的不同。這些基因可以產(chǎn)生三種前肽,之后可分解成三個含39個氨基酸分子的內(nèi)皮素分子。我們可以獲得一系列內(nèi)皮素多肽和前肽家族的功能概述和分子生物學(xué)知識。ET-1對平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞有強烈效應(yīng),并且它也參與很多疾病過程,特別是心血管疾病。ET-1在充血性心力衰竭、腎衰竭和肺動脈高血壓中有重要作用。人的ET-1和牛、犬、鼠、豬、兔和大鼠的ET-1有相同的氨基酸序列。
2、實驗原理
此試劑盒是一種夾心法的ELISA試劑盒,整個試劑盒使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑,*終溶液所顯示的顏色強度與樣品中ET-1的量成正比。測量范圍:0.78~100pg/ml
3、應(yīng)用范圍
IBL的ET-1 ELISA試劑盒可用于人血清、EDTA血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液上清和組織提取液中ET-1的定量檢測。
4、試劑盒成分
1) 包被板:微孔用抗ET15-21兔IgG包被,96孔。
2) 濃縮型酶標(biāo)抗體:HRP標(biāo)記的抗ET-1兔IgG Fab片段,30倍濃縮,0.4ml。
3) 標(biāo)準(zhǔn)品:ET-1,0.5ml×2。
4) EIA緩沖液:內(nèi)含1%的BSA、0.05%的吐溫20的PBS緩沖液,30ml。
5) 用于稀釋酶標(biāo)抗體的稀釋液:內(nèi)含的1%BSA、0.05%的吐溫20的PBS緩沖液,12ml。
6) 顯色劑:TMB底物液,15ml。
7) 終止液:1N的H2SO4,12ml。
8) 濃縮洗滌液:內(nèi)含0.05%吐溫的磷酸緩沖液(40倍濃縮),50ml。
5、操作指南
A、實驗所需器材但試劑盒不提供
1) 酶標(biāo)儀(450nm)
2) 微量移液器和取樣吸頭
3) 帶刻度的量筒與燒杯
4) 蒸餾水
5) 溫育器(37℃±1℃)
6) 冷床箱(4℃)
7) 坐標(biāo)紙(log/log)
8) 吸水紙
9) 用于稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的試管
10) 洗滌瓶
11) 酶標(biāo)抗體稀釋的一次性試管
12) 提取用的Sep-Pak C-18柱和試劑,見“樣品采集”
更新時間:2024/10/11 16:13:03
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