人多配體蛋白聚糖4（Syndecan-4）酶免試劑盒
（日本IBL 27188）
簡介
多配體蛋白聚糖族共有4種(syndecan-1/多配體聚糖, syndecan-2/纖聚糖, syndecan-3/N-多配體聚糖, syndecan-4/抗凝蛋白聚糖)是一類跨膜的硫酸乙酰肝素糖蛋白（HSPGs）. HSPGs主要分布在特定的血管內(nèi)皮細(xì)胞,并以多配體聚糖1,-2,-4和基底外側(cè)表面定向靶的形式存在. syndecan家族成員是一類具有同源跨膜和細(xì)胞質(zhì)外區(qū)的1型跨膜蛋白.這種結(jié)合跨膜的/細(xì)胞質(zhì)域包含有4條完好的酪氨酸殘基, 發(fā)揮著至關(guān)重要的生物學(xué)功能. 多配體蛋白聚-4的胞質(zhì)尾區(qū)還能與粘著分子發(fā)生反應(yīng).眾所周知,多配體蛋白聚糖4發(fā)揮著多種生物學(xué)功能(如抗凝作用, 細(xì)胞粘附, 細(xì)胞增殖)
實驗原理
此試劑盒根據(jù)酶免法的夾心原理，利用兩種不同的高特異性抗體，TMB作為著色劑，顏色強度與人Syndecan-4的量成正比
檢測范圍
20~1280pg/mL
預(yù)期用途
此試劑盒用于血清，EDTA-血漿和細(xì)胞上清中人Syndecan-4的定量檢測
不建議采用肝素-血漿作為試驗樣品
試劑盒組成
1. 包被板，96孔，包被有抗人Syndecan-4兔IgG，親和純化
2. 標(biāo)記抗體濃縮，30X，0.4mlx1，HRP標(biāo)記的抗人Syndecan-4兔IgG Fab’，親和純化
3. 標(biāo)準(zhǔn)品，0.5mlx2，人Syndecan-4
4. EIA緩沖液，30mlx1,1%BSA，含0.05%吐溫20的PBS
5. 標(biāo)記抗體稀釋液，12mlx1,1%BSA，含0.05%吐溫20的PBS
6. 著色劑，15mlx1，TMB底物液
7. 終止液，12mlx1，1N硫酸
8. 洗滌緩沖濃縮液，50mlx1, 40X，含0.05%吐溫20的磷酸緩沖液
實驗所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 移液器和槍頭
3. 燒杯
4. 蒸餾水
5. 冰箱（4℃）
6. 孵箱（37±1℃）
7. 坐標(biāo)紙（對數(shù)-對數(shù)）
8. 吸水紙
9. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管
10. 洗瓶
11. 一次性試驗管
試劑準(zhǔn)備
1. 洗滌緩沖液制備：先將洗滌濃縮液平衡至室溫，充分混勻，然后吸取50ml濃縮液與1950ml的去離子水混勻，即得。配制的洗滌液應(yīng)保存于冰箱內(nèi)，并于2周內(nèi)用完
2. 標(biāo)記抗體的制備：用標(biāo)記抗體稀釋液將標(biāo)記抗體稀釋30倍，即得。
例：如果只測一條板，8孔，則需要標(biāo)記抗體800ul（30ul的標(biāo)記抗體+870ul的標(biāo)記抗體稀釋液，混勻，使用時每孔加100ul）
此步驟在實驗前完成
剩余的標(biāo)記抗體濃縮應(yīng)裝于密封瓶內(nèi)，保存在4℃
3. 標(biāo)準(zhǔn)品的制備：吸取0.5ml的去離子水至標(biāo)準(zhǔn)品瓶內(nèi)，充分混勻，得到2560pg/ml的人Syndecan-4標(biāo)準(zhǔn)品
4. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備8個試管用于標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋，每管加入230ul的EIA緩沖液
更新時間：2024/10/11 16:13:03
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