人硫氧還蛋白酶免試驗檢測試劑
(日本IBL 27417)
簡介
人硫氧還蛋白由105個氨基酸組成,分子量為120道爾頓的蛋白,通過活性位點上兩個鄰近的半胱氨酸反應來調節(jié)體內的氧化還原反應狀態(tài)。
眾所周知,硫氧還蛋白是因應激誘導產生的,如紫外線,輻射,氧化劑和病毒感染,并作為一個生化防御因子抵抗應激力,且有抗氧化作用和調節(jié)細胞內信號分子和轉錄因子的活性。
因此,檢測硫氧還蛋白不僅可以檢測體內應激狀態(tài),還可提高抗逆性研究的進展
實驗原理
此試劑盒根據(jù)酶免法的夾心原理,利用兩種高特異性抗體,TMB作為一種著色劑,顏色的強度與人硫氧還蛋白的量成正比
檢測范圍:3.91—250ng/ml
預期用途
1. 此試劑盒用于血清,EDTA血漿,尿液和上清中的人硫氧還蛋白的定量檢測
2. 以防上清介質中含有FCS,我們建議設置一中陰性質控作為試驗樣品空白孔
試劑盒組成
1. 預包被板,96孔,抗人硫氧還蛋白小鼠IgG單抗親和純化
2. 標記抗體濃縮液,0.4mlx1,,30X,HRP標記抗人硫氧還蛋白兔IgGFab’親和純化
3. 標準品,1.0mlx2,重組人硫氧還蛋白
4. EIA緩沖液,30mlx1,1%BSA,含0.05%吐溫20的PBS
5. 標記抗體稀釋液,12mlx1,1%BSA,含0.05%吐溫20的PBS
6. 著色劑,15mlx1,TMB底物液
7. 終止液,12mlx1,1N硫酸
8. 洗滌緩沖濃縮液,50mlx1,40X,含0.05%吐溫20的磷酸緩沖液
實驗所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標儀
2. 移液器和槍頭
3. 燒杯
4. 去離子水
5. 吸水紙
6. 用于稀釋標準品的試管
7. 洗瓶
一次性試驗管
特別注意
1. 試驗樣品采集后應立即檢測,凍存的樣品避免反復凍融,檢測前應先將其完全溶解混勻
2. 試驗樣品用EIA緩沖液稀釋
3. 試驗樣品和標準品應做雙份檢測
4. 試驗樣品應在中性PH范圍,有機溶劑的污染可能會影響檢測
5. 只能用試劑盒提供的洗滌液洗板,否則會導致試驗失敗
6. 吸水紙上拍干微孔板,不能擦拭
7. TMB底物液應貯存于黑暗處,因其對光敏感,且避免接觸金屬
8. 加入終止液后30min內必須酶標儀讀數(shù)
結果計算
繪制曲線前,所有的數(shù)據(jù)都應減去試驗樣品空白值,包括標準品和未知的樣品。以標準品的OD值和濃度在對數(shù)-對數(shù)坐標紙上繪制標準曲線,從標準曲線上可直接讀取未知樣品的濃度
更新時間:2024/10/12 16:42:07
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