人APP770酶免試驗(yàn)檢測(cè)試劑
(日本IBL 27736)
簡(jiǎn)介
阿爾茨海默病(AD)是典型的老年性癡呆,腦組織內(nèi)淀粉樣蛋白β(Aβ)的累積是造成此病的主要原因,與此同時(shí),患有AD的患者其累積的Aβ90%在腦血管壁上發(fā)現(xiàn)。眾所周知,Aβ是由可分解出兩種蛋白(β-和γ-分泌)的淀粉樣前體蛋白(APP)產(chǎn)生的,累積在腦組織內(nèi)的Aβ分子主要是由神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的APP表達(dá)產(chǎn)生,即APP695.與此相反,另一不同APP即APP770,表達(dá)于腦血管內(nèi)皮細(xì)胞,*新報(bào)道稱,APP770產(chǎn)生的Aβ也在腦血管壁上累積
此elisa試劑盒用于EDTA-血漿,腦脊髓液和上清中人APP770的檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)原理
此試劑盒是一種夾心法的ELISA試劑盒,使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑,*終溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中APP770的量成正比
檢測(cè)范圍
0.10~6.2ng/mL
預(yù)期用途
僅用于研究,不能用于診斷
此試劑盒用于EDTA-血漿腦脊液和細(xì)胞上清中人APP770的定量檢測(cè)
試劑盒組成
1. 微孔板,96T,包被有抗人APP OX2(351)兔子IgG抗體,親和純化
2. 標(biāo)記抗體濃縮,30X,0.4ml,HRP標(biāo)記的抗人APP(R101A4)小鼠IgG 單抗Fab片段
3. 標(biāo)準(zhǔn)品,0.5ml,2支,重組人APP770
4. EIA緩沖液,30ml,1%的BSA,含0.05%的吐溫20的PBS
5. 標(biāo)記抗體稀釋液,12ml,1%的BSA,含0.05%的吐溫20的PBS
6. 著色劑,TMB,15ml
7. 終止液,1N硫酸,12ml
8. 洗滌緩沖濃縮液,40X,50ml,0.005%吐溫20的磷酸緩沖液
準(zhǔn)備步驟
試驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
l 洗滌瓶
特別注意
1. 試驗(yàn)樣品采集后應(yīng)立即檢測(cè)或是凍存,凍存的樣品避免反復(fù)凍融,檢測(cè)前應(yīng)在低溫下先將其完全溶解混勻
2. 試驗(yàn)樣品用EIA緩沖液稀釋
3. 試驗(yàn)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)做雙份檢測(cè)
4. 試驗(yàn)樣品應(yīng)在中性PH范圍,有機(jī)溶劑的污染可能會(huì)影響檢測(cè)
5. 只能用試劑盒提供的洗滌液洗板,否則會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)失敗
6. 吸水紙上拍干微孔板,不能擦拭
7. TMB底物液應(yīng)貯存于黑暗處,因其對(duì)光敏感,且避免接觸金屬
8. 加入終止液后30min內(nèi)必須酶標(biāo)儀讀數(shù)
結(jié)果計(jì)算
繪制曲線前,所有的數(shù)據(jù)都應(yīng)減去試驗(yàn)樣品空白值,包括標(biāo)準(zhǔn)品和未知的樣品。以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值和濃度在對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可直接讀取未知樣品的濃度