人半乳糖凝集素-3 檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
（Human Galectin-3 Assay Kit）
（日本IBL 27755）
簡介
半乳糖凝集素廣泛分布于線蟲類，昆蟲類，多孔動物和脊椎動物及真菌；半乳糖凝集素不僅只出現(xiàn)于細胞質(zhì)內(nèi)，細胞核，細胞表面，細胞外基質(zhì)等都會出現(xiàn)，同時也參與了許多的生物學(xué)現(xiàn)象，包括發(fā)育，分化，形態(tài)發(fā)生，腫瘤轉(zhuǎn)移，細胞死亡和RNA剪切
半乳糖凝集素是一種β-半乳糖苷結(jié)合蛋白，曾用名有IgE結(jié)合蛋白，CBP35, CBP30, Mac-2, L-29, L-31, L-34等，由糖鏈結(jié)合域（半乳糖凝集素域）和非凝集素域組成的嵌合型凝集素結(jié)構(gòu)
半乳糖凝集素生物學(xué)功能還未確定，但有許多研究已闡明半乳糖凝集素-3 參與了細胞增殖，黏附，代謝和凋亡；例如，半乳糖凝集素表達與固定細胞株內(nèi)惡性轉(zhuǎn)變程度呈正相關(guān)關(guān)系，近期也有研究報道半乳糖凝集素-3表達與惡性腫瘤的惡性程度呈正相關(guān)，所以檢測半乳糖凝集素-3 可作為腫瘤惡化程度的指標(biāo)
實驗原理
此試劑盒是一種夾心法的elisa試劑盒，使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑，顯色的強度與人樣品中半乳糖凝集素-3的量成正比
檢測范圍
117.19~7500 pg/ml
預(yù)期用途
1. 可用于細胞培養(yǎng)物和臨床標(biāo)本裂解物中人半乳糖凝集素-3的檢測（如甲狀腺細針抽吸細胞標(biāo)本）
實例1 ：
吸取適量的試劑盒提供的"EIA 緩沖液"稀釋細胞上清，然后用于實驗
實例2：
加500 ul的TNE緩沖液（10 mM Tris pH8.0, 1% NP-40, 0.15M NaCl, 1 mM EDTA）或是IBL 貨號為19022的IBLysis-Ⅰ（裂解緩沖液）（大致范圍：1×105−1×107 cells）至培養(yǎng)細胞或是臨床標(biāo)本，振蕩器上充分混勻，4℃下混勻30min，混勻完全后，10000 rpm 下離心10min，然后用試劑盒內(nèi)提供的“EIA緩沖液”適當(dāng)稀釋（大約5-10倍），用于檢測
2. 人半乳糖凝集素-3 與總蛋白成比例，建議溶解后檢測總的蛋白（檢測總的蛋白采用羅氏蛋白質(zhì)定量檢測法）
3. 若檢測細胞，則建議任何時候都應(yīng)進行細胞計數(shù)
4. 若檢測血清或血漿中的人半乳糖凝集素-3 ，則建議用試劑盒內(nèi)提供的“EIA緩沖液”適當(dāng)稀釋（大約4-10倍），用于試驗樣本
試劑盒組成
1. 包被板，96孔，包被了抗人半乳糖凝集素-3（50A3）小鼠 IgG 單抗
2. 標(biāo)記抗體0.4ml x1 ,30倍濃縮，HRP標(biāo)記的抗人半乳糖凝集素-3 （87B5）小鼠 IgG 單抗
3. 標(biāo)準(zhǔn)品，0.5mlx2，重組人半乳糖凝集素-3
4. EIA緩沖液，30mlx1，1% BSA, 0.05% Tween 20 的PBS
5. 標(biāo)記抗體稀釋液，12mlx1，1% BSA, 0.05% Tween 20 的PBS
6. 顯色劑，TMB ，15mlx1
7. 終止液，12mlx1,1N的硫酸
8. 濃縮洗滌緩沖液，50mlx1,04倍濃縮，0.05%吐溫20 的磷酸緩沖液
實驗所需材料但試劑盒未提供
酶標(biāo)儀（450nm） 移液器和槍頭
量筒和燒杯 去離子水
冰箱（4℃） 坐標(biāo)紙（對數(shù)/對數(shù)）
吸水紙 試管（用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋）
孵箱（37±1℃） 洗瓶（用于洗板）
一次性試管，用于“濃縮標(biāo)記抗體”和“顯色劑”
更新時間：2024/10/12 16:42:08
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