雙酚A酶免試劑盒
(日本IBL 27766)
簡介
雙酚A(BPA)是環(huán)氧樹脂和聚碳酸酯的主要原材料,疑似一種內(nèi)分泌干擾物。BPA可制造聚碳酸酯塑料,用于嘴巴直接接觸的食品容器和奶瓶,還可制造環(huán)氧樹脂,用于食品和飲料罐襯里。在日本,每年有超過48萬噸的BPA產(chǎn)生,環(huán)保部門的水質(zhì)調(diào)查報(bào)告顯示河水中的BPA含量為0.11ug/mL,所以我們擔(dān)心它將會(huì)對(duì)水生生物和生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生不利的影響,Vom Saal實(shí)驗(yàn)顯示,給一只懷孕的小鼠注射2ug/kg.d 的BPA或是閾限值的1/25,結(jié)果產(chǎn)下的雄性小鼠的甲狀腺增大
此試劑盒僅用于血清或血漿中BPA的檢測(cè);采用的是抗兔IgG抗體包被的酶免法
實(shí)驗(yàn)原理
此試劑盒基于競(jìng)爭法ELISA,固相包被抗兔IgG抗體。BPA標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,酶標(biāo)記的BPA和抗BPA-血清加入至包被板內(nèi)發(fā)生反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后,洗板,加入底物液TMB,之后酶標(biāo)儀上測(cè)吸收值。畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得樣品中BPA的濃度
檢測(cè)范圍
0.3~100ng/ml
預(yù)期用途
此試劑盒用于定量檢測(cè)人血清和血漿中的雙酚A
注意設(shè)備和裝樣容器造成的污染
試劑盒組成
1. 包被板:包被抗兔IgG抗體 96孔×1
2. 標(biāo)記的BPA: 辣根過氧化物酶標(biāo)記的BPA 6mL×1
3. 標(biāo)準(zhǔn)品:BPA(0ng/ml,0.3ng/ml,1 ng/ml,3ng/ml,10ng/ml,30ng/ml,100ng/ml) 0.3mL×7
4. 抗BPA抗血清 6mL×1
5. 顯色液:TMB液 15mL×1
6. 終止液:1N 硫酸 12mL×1
7. 濃縮的洗滌液: (40×)含0.05%Tween20 的磷酸緩沖液 50mL×1
實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 移液器和槍頭
3. 燒杯
4. 蒸餾水
5. 混合器
6. 坐標(biāo)紙(對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù))
7. 吸水紙
8. 洗瓶
9. 一次性試驗(yàn)管
準(zhǔn)備
洗滌液的稀釋
將洗滌液平衡至室溫后,吸取50mL洗滌液,然后加入1950mL的去離子水充分混勻。稀釋好的洗滌液應(yīng)該在冰箱里儲(chǔ)存,并且在稀釋后兩星期內(nèi)用完。
注:其他的試劑都是即用型的
實(shí)驗(yàn)步驟(詳詢)
所有試劑在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該平衡到室溫,并且要充分混勻。確保試劑都沒有質(zhì)量問題。
注意事項(xiàng):
1. 用血清或血漿作為樣本,如果要儲(chǔ)存必須儲(chǔ)存在-20℃
2. 建議樣品和標(biāo)準(zhǔn)品做雙份檢測(cè)
3. 試驗(yàn)樣品應(yīng)在中性PH范圍,有機(jī)溶劑的污染可能會(huì)影響檢測(cè)
4. 只能使用此試劑盒的洗滌液,不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗
5. 在紙巾上拍板,完全地去除洗滌液,不要用紙巾擦微孔
6. 顯色液應(yīng)該避光保存,因其對(duì)光敏感,且避免接觸金屬
7. 加入終止液后30min內(nèi)必須酶標(biāo)儀讀數(shù)
更新時(shí)間:2024/10/11 16:13:03
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