大鼠富亮氨酸α2 糖蛋白(LRG)檢測試劑盒
(日本IBL 27770)
簡介
富亮氨酸α2 糖蛋白(LRG)是富亮氨酸重復(fù)單位家族蛋白的一員,LRG參與蛋白-蛋白間相互作用,信號轉(zhuǎn)導(dǎo),細(xì)胞粘附與發(fā)育;近期報道稱類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清中的LRG水平與健康質(zhì)控對比顯著升高,經(jīng)抗TNF治療后,又會降低;另一報告稱特發(fā)性正常顱壓腦積水患者腦脊液中的LRG水平與質(zhì)控相比也顯著性升高,這一結(jié)果可能可以將特發(fā)性正常顱壓腦積水患者從其他顯示類似癥狀的如老年癡呆患者中區(qū)分出來
此試劑盒用于檢測大鼠LRG
實驗原理
此試劑盒是一種夾心法的elisa試劑盒,使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑,*終溶液所顯示的顏色強度與樣品中大鼠LRG的量成正比
檢測范圍
6.25 - 400 ng/mL
預(yù)期用途
僅供研究,不能用于診斷
1. 此試劑盒可用于血清,EDTA血漿,尿液,細(xì)胞上清中大鼠LRG的定量檢測
2. 血清或血漿樣本需進(jìn)行EIA緩沖液4或8倍的稀釋,合理的雙倍稀釋不能檢測血液樣本中的LRG
3. 尿液樣本需進(jìn)行EIA緩沖液 大約8倍的稀釋
試劑盒組成
1. 包被板,96孔,包被了抗大鼠LRG(191)兔IgG親和純化
2. 標(biāo)記抗體,濃縮,0.4ml x1,30倍濃縮,HRP標(biāo)記的抗大鼠LRG(312)兔IgG Fab’親和純化
3. 標(biāo)準(zhǔn)品,0.5ml x2 ,重組大鼠LRG
4. EIA緩沖液,30ml x 1,磷酸緩沖液
5. 標(biāo)記抗體稀釋液,12ml x 1,含1% BSA, 0.05% 吐溫20 的 PBS
6. 顯色劑,15ml x 1,TMB
7. 終止液,12ml x 1,1N的硫酸
8. 洗滌緩沖液,50ml x 1,40倍濃縮,磷酸緩沖液
操作步驟
1. 實驗所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 移液器和槍頭
3. 帶刻度的量筒和燒杯
4. 去離子水
5. 冰箱(4℃)
6. 坐標(biāo)紙(對數(shù)/對數(shù))
7. 吸水紙
8. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋試管
9. 孵箱(37±1℃)
10. 洗瓶
11. 一次性試管
特別注意
1. 試驗樣品采集后應(yīng)立即檢測或是凍存,凍存的樣品避免反復(fù)凍融,檢測前應(yīng)在低溫下先將其完全溶解混勻
2. 試驗樣品用EIA緩沖液稀釋
3. 試驗樣品和標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)做雙份檢測
4. 試驗樣品應(yīng)在中性PH范圍,有機溶劑的污染可能會影響檢測
5. 只能用試劑盒提供的洗滌液洗板,不充足或過多的洗滌會導(dǎo)致試驗失敗
6. 吸水紙上拍干微孔板,不能擦拭
7. TMB底物液應(yīng)貯存于黑暗處,因其對光敏感,且避免接觸金屬
8. 加入終止液后30min內(nèi)必須于酶標(biāo)儀讀數(shù)
結(jié)果計算
繪制曲線前,所有的數(shù)據(jù)都應(yīng)減去試驗樣品空白值,包括標(biāo)準(zhǔn)品和未知的樣品。以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值和濃度在對數(shù)-對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可直接讀取未知樣品的濃度
更新時間:2024/10/11 16:13:03
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