人可溶性α–klotho蛋白酶免試劑
（日本IBL 27998）
簡介
α–klotho被定義為極端的下調基因，它在轉基因小鼠（klotho小鼠）的表現(xiàn)類似于人類衰老的各種癥狀，α–klotho基因的序列已在多個物種中得到確定，包括人類（基于轉基因小鼠），α–klotho蛋白是分子量為130kDa的橫跨膜蛋白，并在腎臟和甲狀旁腺內表達。
近年來，已證實α–klotho是生物體內礦物質代謝的重要分子，如鈣和磷的代謝。因此，有人認為，klotho小鼠的早期老化癥狀就是因α–klotho的表達減少導致礦物質穩(wěn)態(tài)破壞而引起，與此同時，有報道稱，組成α–klotho蛋白序列的主要部分：長N-端胞外域，因脫落釋放至血液中。然而對于可溶性α–klotho蛋白的功能和濃度的變化仍存在很多疑問，所以要求研發(fā)一套α–klotho的檢測系統(tǒng)
實驗原理
此試劑盒根據(jù)酶免法的夾心原理，利用兩種不同的高特異性抗體，TMB作為著色劑，顏色強度與人可溶性α–klotho的量成正比
檢測范圍
93.75~6000pg/mL
預期用途
此試劑盒可用于血清，血漿和尿液中人可溶性α–klotho的定量檢測
試劑盒組成
1. 包被板，96孔，包被有抗人可溶性α–klotho（67G3）小鼠IgG單抗，親和純化
2. 標記抗體濃縮，30X，0.4mlx1，HRP標記的抗人可溶性α–klotho小鼠IgG Fab’，親和純化
3. 標準品，0.5mlx2，重組人可溶性α–klotho
4. EIA緩沖液，30mlx1
5. 標記抗體稀釋液，12mlx1,1%BSA，含0.05%吐溫20的PBS
6. 著色劑，15mlx1，TMB底物液
7. 終止液，12mlx1，1N硫酸
8. 洗滌緩沖濃縮液，50mlx1, 40X，含0.05%吐溫20的磷酸緩沖液
實驗所需材料但試劑盒未提供
1. 酶標儀（450nm）
2. 移液器和槍頭
3. 燒杯
4. 蒸餾水
5. 孵箱（37±1℃）
6. 坐標紙（對數(shù)-對數(shù)）
7. 吸水紙
8. 標準品稀釋管
9. 洗瓶
10. 一次性試驗管
試劑準備
1. 洗滌緩沖液制備：先將洗滌濃縮液平衡至室溫，充分混勻，然后吸取50ml濃縮液與1950ml的去離子水混勻，即得。配制的洗滌液應保存于冰箱內，并于2周內用完
2. 標記抗體的制備：用標記抗體稀釋液將標記抗體稀釋30倍，即得。
更新時間：2024/10/12 16:42:08
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