人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
(日本IBL:27171)
前言說(shuō)明
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是一種同型二聚體蛋白,*初人們是從富含正常牛垂體濾泡星形蛋白細(xì)胞的基質(zhì)中分離純化得到,由各種血管組織分泌。后來(lái)人們發(fā)現(xiàn)VEGF與一種血管通透因子(VPF)相同, VPF是之前在富含腫瘤細(xì)胞系的基質(zhì)中鑒別得到的,腫瘤細(xì)胞可以提高毛細(xì)血管的通透性。據(jù)報(bào)道,VEGF的活性包括促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng),促進(jìn)血管的生成和提高毛細(xì)血管的通透性。VEGF是一種分子量為38.2kDa的同型二聚體,它由兩條含165個(gè)氨基酸的多肽鏈組成。多數(shù)人腫瘤細(xì)胞都會(huì)分泌VEGF,包括:人肺腺癌、胰腺癌、肝癌、腎癌、纖維肉瘤、HL60早幼粒細(xì)胞性白血病、GS-9L神經(jīng)膠質(zhì)瘤和U937淋巴瘤細(xì)胞。一些正常的組織也會(huì)分泌VEGF,如:活化的巨噬細(xì)胞、角質(zhì)化細(xì)胞、肝細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、胚胎成纖維細(xì)胞、支氣管及脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞,腎小球內(nèi)臟上皮及其系膜細(xì)胞。IBL公司的人VEGF ELISA試劑盒可用于人EDTA血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中VEGF的定量檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)原理
此試劑盒是一種夾心法的ELISA試劑盒,使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑,*終溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中VEGF的量成正比。
測(cè)定范圍
15.63~1000pg/ml (次溫育:37℃下溫育60min)
7.81~500pg/ml (次溫育:4℃下溫育過(guò)夜)
預(yù)期用途
此試劑盒可用于人EDTA血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清VEGF的體外定量檢測(cè)。此試劑可識(shí)別天然的和重組的VEGF。利用夾心法的酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),采用了高特異性的多克隆抗體和單克隆抗體。
試劑盒成分
1) 包被板:微孔中包被了抗人VEGF-1(16F1)的鼠IgG單克隆抗體,96孔。
2) 濃縮型酶標(biāo)抗體:HRP標(biāo)記的抗人VEGF-1兔IgG Fab片段,30倍濃縮,0.4ml
3) 標(biāo)準(zhǔn)品:內(nèi)含重組的人VEGF 165,0.5ml×2
4) EIA緩沖液:1%的BSA,含0.05%的吐溫的PBS,30ml
5) 酶標(biāo)抗體稀釋液:內(nèi)含的1%BSA、0.05%吐溫20的PBS,12ml
6) 顯色劑:TMB底物液,15ml
7) 終止液:1N的H2SO4,12ml
8) 濃縮洗滌液:內(nèi)含0.05%吐溫的磷酸緩沖液(40倍濃縮),50ml。
實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供