人血管生成素樣蛋白3 （超敏）試劑盒
日本IBL 編號: 27750
簡介
血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)是由肝臟分泌的一種類激素蛋白，參與脂質(zhì)新陳代謝和血管生成。血管生成素樣蛋白3的結(jié)構(gòu)與參與血管生成的血管生成素家族蛋白相似。它有螺旋域和纖維蛋白原樣域，但沒發(fā)現(xiàn)能與Tie家族結(jié)合。研究發(fā)現(xiàn)，ANGPTL3的基因表達(dá)受LXR因子調(diào)控，是一種備受關(guān)注的新穎分泌因子
實驗原理
此試劑盒是一種夾心法的ELISA試劑盒，使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑，顯色的強度與人樣品中ANGPTL3的量成正比
檢測范圍:
0.47 - 30 ng/mL
預(yù)期用途
此日本IBL人血管生成素樣蛋白3ELISA檢測試劑盒能用于人血清，EDTA血漿和細(xì)胞培養(yǎng)基上清中人血管生成素樣蛋白3（ANGPTL3）的定量檢測
試劑盒組成
1. 微孔板：
包被有抗人ANGPTL3 (45B1)小鼠IgG單抗，親合純化 96孔x 1
2. 標(biāo)記抗體：
（30倍濃縮），HRP標(biāo)記抗人ANGPTL3 (F48A1)小鼠IgG，親合純化0.4mlx 1
3. 標(biāo)準(zhǔn)品：重組人血管生成素樣蛋白3 0.5mL x 2
4. EIA緩沖液： 30mL x 1
5. 標(biāo)記抗體稀釋液：1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS 12mL x 1
6. 顯色劑：TMB底物液 15mL x 1
7. 終止液：1N硫酸 12mL x 1
8. 洗滌緩沖濃縮液:（40倍濃縮），0.05%吐溫20的磷酸緩沖液 50mL x 1
操作指南
實驗所需材料但試劑盒未提供
酶標(biāo)儀（450nm） 移液器和槍頭
量筒和燒杯 去離子水
冰箱（4℃） 坐標(biāo)紙（對數(shù)/對數(shù)）
吸水紙 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋試管
孵箱（37±1℃）
洗瓶（用于洗板）
一次性試驗試管
試劑準(zhǔn)備
1. 洗滌緩沖液制備：
此洗滌液是一種40倍濃縮液。先將洗滌濃縮液平衡至室溫，充分混勻，然后吸取50ml濃縮液與1950ml的去離子水混勻，即得。配制的洗滌液應(yīng)保存于冰箱內(nèi)，并于2周內(nèi)用完
2. 稀釋標(biāo)記抗體的制備：
標(biāo)記抗體是一種30倍濃縮液，用標(biāo)記抗體稀釋液將標(biāo)記抗體稀釋30倍，即得。
例：如果只測一條板，8孔，則需要標(biāo)記抗體800ul（30ul的標(biāo)記抗體+870ul的標(biāo)記抗體稀釋液，混勻，使用時每孔加100ul）
濃縮酶標(biāo)記抗體需稀釋后才能用于實驗
剩余的濃縮標(biāo)記抗體應(yīng)裝于密封瓶內(nèi)，保存在4℃
3. 標(biāo)準(zhǔn)品的制備：吸取0.5ml的去離子水至標(biāo)準(zhǔn)品瓶內(nèi)，充分混勻，得到60 ng/mL的人ANGPTL3標(biāo)準(zhǔn)品
4. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備8個試管用于標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋，每管加入230ul的EIA緩沖液
每管的濃度如下
1號管 30ng/ml
2號管 15ng/ml
3號管 7.5ng/ml
4號管 3.75ng/ml
5號管 1.88ng/ml
6號管 0.94ng/ml
7號管 0.47ng/ml
8號管 0ng/ml（試驗樣品空白）
吸取230ul的標(biāo)準(zhǔn)品于1號管混勻，然后從1號管吸取230ul加入2號管，依次連續(xù)進(jìn)行2倍比稀釋，標(biāo)準(zhǔn)品范圍為0.47~30ng/ml.第8管為樣品空白，濃度為0 ng/mL
5. 樣品稀釋：
樣品如需稀釋，必須用EIA緩沖液稀釋，若預(yù)先不知樣本濃度的大概范圍，則需對樣本進(jìn)行幾個不同稀釋比例的預(yù)實驗，然后確定*佳稀釋比例
更新時間：2024/10/11 16:13:03
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