人TNF-β檢測(cè)試劑盒(ELISA)問(wèn):ELISA方法的操作方法有哪些?
答:ELISA的操作方法有間接法、捕獲法、競(jìng)爭(zhēng)法、雙抗原夾心法和雙抗體夾心法。
通用名稱:人TNF-β檢測(cè)試劑盒(ELISA法)
英文名稱:RayBio® Human TNF-alphβ ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào):TNF-b
產(chǎn)品規(guī)格:96T
檢測(cè)樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液
公司品牌:美國(guó)RayBio
儲(chǔ)存條件:-20℃
檢測(cè)方法:ELISA方法
預(yù)期用途:定量測(cè)定人血清血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的TNF-β的含量。
參考價(jià)格:詢價(jià)
供應(yīng)商家:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司 人TNF-β檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途RayBio®人TNF-βelisa試劑盒采用體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法,定量測(cè)定人血清(正常血清和血漿中的人TNF-β濃度低,在該測(cè)定中可能無(wú)法檢測(cè)到),血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的TNF-β的含量。人TNF-β檢測(cè)試劑盒組成成分●TNF-β酶標(biāo)板(項(xiàng)目A)——12*8=96孔,包被有抗人TNF-β抗體——4℃ 1個(gè)月
●濃縮洗滌液(20x)(項(xiàng)目B)——20x濃縮溶液 25ml——4℃ 1個(gè)月
●標(biāo)準(zhǔn)蛋白(項(xiàng)目C)——2瓶人類TNF-β。1個(gè)小瓶就夠配制每個(gè)一式兩份的標(biāo)準(zhǔn)品。—— -80℃1個(gè)月
●檢測(cè)抗體TNF-β(項(xiàng)目F)——2瓶生物素化的抗人TNF-α。
●每個(gè)小瓶足以測(cè)定微板的一半。——4℃ 5天
●濃縮HRP-鏈霉親和素(項(xiàng)目G)——200μl 700X濃縮HRP綴合鏈霉親和素——不能保存和重新使用
●一步法TMB底物(項(xiàng)目H)——TMB溶液12ml——N/A
●終止液(項(xiàng)目I)——8ml 0.2M硫酸——N/A
●測(cè)定稀釋劑A(項(xiàng)目D)——30ml稀釋緩沖液,0.09%疊氮化吶防腐劑。——N/A
●測(cè)定稀釋劑B(項(xiàng)目E)——15ml 5X濃縮液——4℃ 1個(gè)月
●將未使用的板條重新裝回到含有干燥劑包的袋中,沿著整個(gè)邊緣重新密封。人TNF-β檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理人TNF-β檢測(cè)試劑盒使用包被有人TNF-β特異性抗體的96孔酶標(biāo)板,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品被加入到孔中,樣品中存在的TNF-β通過(guò)固相的抗體與孔結(jié)合。洗滌后加入生物素化的抗人TNF-β抗體。 洗去未結(jié)合的生物素化抗體后,將HRP-標(biāo)記的鏈霉素加入到到孔中。 再次洗滌板孔,向孔中加入TMB底物溶液,底物顯色與所結(jié)合的TNF-β量成比例。 加入終止液顏色從藍(lán)色變?yōu)辄S色,并且在450nm處測(cè)量顏色的吸光度值。人TNF-β檢測(cè)試劑盒存儲(chǔ)人TNF-β檢測(cè)試劑盒可在-20°C下保存,從裝運(yùn)之日起存放可長(zhǎng)達(dá)1年。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。 試劑盒可以在4℃下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。 對(duì)于更長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存時(shí),建議儲(chǔ)存在-80°C。人TNF-β檢測(cè)所需材料(試劑盒內(nèi)不提供)●能夠測(cè)量450 nm處吸光度的酶標(biāo)儀。
●提供2μl至1 ml體積的精密移液管。
●可調(diào)1-25毫升移液器用于試劑制備。
●100毫升和1升刻度量筒。
●吸水紙。
●蒸餾水或去離子水。
●雙對(duì)數(shù)做圖紙或計(jì)算機(jī)和軟件進(jìn)行ELISA數(shù)據(jù)分析。
●準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品或樣品稀釋液的管子。人TNF-β檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟●使用前將所有試劑和樣品置于室溫(18 - 25ºC)。建議所有標(biāo)準(zhǔn)和樣品至少重復(fù)一次。
●根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)標(biāo)記可拆卸的8孔條。
●分別加入樣品和每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品100μl(參見試劑制備步驟3)到適當(dāng)?shù)陌蹇字。蓋上蓋子,室溫溫和振蕩孵育2.5小時(shí)
●棄去溶液,用1X洗滌液洗滌4次。使用多通道移液器或自動(dòng)洗板機(jī)洗板,每孔加入洗滌緩沖液(300μl)。每個(gè)步驟中去除液體對(duì)于良好的性能是至關(guān)重要的。洗完后,通過(guò)吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡。
●每孔加入100μl1X制備的生物素化抗體(試劑制備步驟6)。在室溫下溫和振蕩孵育1小時(shí)。
●棄去溶液。重復(fù)洗滌,如步驟4。
●加入100μl制備的鏈霉親和素溶液(見試劑制備步驟7)。在室溫下溫和搖動(dòng)孵育45分鐘。
●棄去溶液。 重復(fù)洗滌,如步驟4。
●向每個(gè)孔中加入100μlTMB一步底物試劑(項(xiàng)目H)。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘。
●向每個(gè)孔中加入50μl終止液(項(xiàng)目I)。 立即讀取450 nm處吸光度值。人TNF-β檢測(cè)試劑盒相關(guān)熱門產(chǎn)品推薦KRD01001——活化素A——規(guī)格:48/96T——LISA方法——品牌:進(jìn)口分裝
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更新時(shí)間:2024/10/11 16:13:03
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