通用名稱：布魯氏桿菌IgG 檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Brucella IgG ELISA布魯氏桿菌IgG檢測試劑盒預(yù)期用途布魯氏桿菌IgG檢測試劑盒可用于人血清和血漿中布魯氏桿菌IgG抗體的定性和定量檢測。樣品采集與儲存血清，血漿（EDTA，肝素）按照一般原則進(jìn)行靜脈采血。自樣品采集到檢測都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)完整性。不要使用易容血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，實驗前應(yīng)將其離心以除去顆粒物質(zhì)。貯存——2-8℃-20℃，穩(wěn)定性——7天＞7天，避免高溫和太陽直射，避免反復(fù)凍融。
布魯氏桿菌IgG檢測試劑盒檢測原理布魯氏桿菌IgG檢測試劑盒利用的是夾心法的原理。包被孔內(nèi)包被了抗原，用對人IgG有特異性的酶標(biāo)抗體來檢測樣品中的特異性抗體（此抗體可結(jié)合到包被抗原上）。底物反應(yīng)后，所顯示的顏色的強(qiáng)度與檢測到的IgG特異性抗體的量正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得。
布魯氏桿菌IgG檢測試劑盒儲存與穩(wěn)定性布魯氏桿菌IgG檢測試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。試劑盒開封后，有效期為3個月。
布魯氏桿菌IgG檢測試劑盒成分★包被板（1×12×8）可拆，包被有特異性抗原。
★標(biāo)準(zhǔn)品A-D（1×4×2ml）1；10；40；150U/mL，即用
標(biāo)準(zhǔn)品A=陰性質(zhì)控 ——標(biāo)準(zhǔn)品B=臨界質(zhì)控
標(biāo)準(zhǔn)品C=弱陽性質(zhì)控——標(biāo)準(zhǔn)品D=陽性質(zhì)控
★內(nèi)含抗布魯氏桿菌的IgG抗體，PBS（磷酸緩沖液），穩(wěn)定劑。
★酶標(biāo)IgG（1×15ml）紅色，即用。內(nèi)含辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人IgG，蛋白緩沖液，穩(wěn)定劑。
★稀釋液（1×60ml）含PBS緩沖液，＜0.1%NaN3
★濃縮洗滌液（1×60ml）
★濃縮型（10×），含PBS緩沖液，吐溫20
★TMB底物液（1×15ml）含TMB
★TMB終止液（1×15ml）0.5M的H2SO4
★封板紙——2×——用于在溫育時遮蓋包被板
★自封袋——1×——用于儲存不用的板條布魯氏桿菌IgG檢測實驗所需材料但（試劑盒內(nèi)不提供） - ☆移液器，體積：5；50；100；500 µL
- ☆校準(zhǔn)儀
- ☆樣品稀釋用試管（1ml）
- ☆帶試劑儲器8道移液器
- ☆洗滌瓶，自動或半自動洗板機(jī)
- ☆能在450nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀
- ☆雙蒸水或去離子水
- ☆吸水紙，取樣吸頭和計時器
樣品稀釋血清、血漿用稀釋緩沖液按1:101比例稀釋
例：5ul+500ul稀釋緩沖液
如果樣品中IgG濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品則應(yīng)進(jìn)一步稀釋。布魯氏桿菌IgG檢測步驟 - ☆加100µL標(biāo)準(zhǔn)品和已稀釋樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中，在定性檢測中只使用標(biāo)準(zhǔn)品B。
- ☆封板后室溫（18℃-25℃）溫育60分鐘。
- ☆移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。
- ☆在每一微孔中加入100µL酶聯(lián)物。
- ☆封板后室溫（18℃-25℃）溫育30分鐘。
- ☆移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。
- ☆如果有條件的話，可使用8孔微量移液器加底物液和終止液，確保底物液和終止液都是以相同的時間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生。
- ☆每孔加TMB底物液100µL。
- ☆室溫（18℃-25℃）避光溫育20分鐘。
- ☆在每一微孔中加入100µLTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動包被板以使試劑混合均勻。此時，顏色藍(lán)色變成黃色。
- ☆加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測OD值。
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